Эритроцитарная антигенная система аво. Антигенные системы крови Антигены системы аво и резус

Группа крови - это основная серологическая система, определяющая совместимость или несовместимость крови при ее переливании. В нее входят два генетически детерминированных агглютиногена А и В и два агглютинина - б и в.

Агглютинины (б, в) - белки плазмы крови.

Распределение групп крови среди людей: О (I) - 33,5% людей, А (II) - 37,8%, В (III) - 20,6%, АВО (IV) - 8,1%.

При наличии одноименных агглютиногенов и агглютининов (А и б, В и в) происходит реакция агглютинации (склеивания).

На основании этого, разработана схема переливания эритроцитарной массы между реципиентами с разной группой крови.

Схема переливания эритроцитарной массы

Определение группы крови по системе АВО проводят различными способами, в том числе по стандартным изогемаглютинирующим сывороткам I, II, III групп: используются два ряда стандартных сывороток. В каплю сыворотки вносятся эритроциты исследуемого в соотношении 10:

1. Реакция проводится при комнатной температуре. Существует современный способ, основанный на использовании моноклональных антител - цоликлои анти-А и цоликлон анти-В. Этот метод позволяет избежать ошибок, возможных из-за наличия слабых антигенов типа А2. Для надежного определения групповой принадлежности в сомнительных случаях, например, при подозрении на наличие Ад, используется перекрестный метод - к стандартным эритроцитам I, II и III групп добавляется исследуемая сыворотка. Во всех методиках критерием оценки является появление в соответствующих случаях агглютинации эритроцитов.

Переливание крови с учетом групповой принадлежности осуществляется только по принципу одноименной группы: кровь донора I группы можно переливать реципиенту I группы, кровь донора II группы - реципиенту П группы и т.д. В экстренных ситуациях возможно применение правила Оттенберга, широко использовавшееся вх годах (человек с I группой - универсальный донор, его кровь можно переливать всем, а человек с IV группой - универсальный реципиент), но в этих случаях порция вводимой крови ограничиваетсямл.

Система резус

Система резус открыта в результате иммунизации кроликов кровью обезьян - макак-резусов (Ланд-штейнер, Винер, гг.). В настоящее время выявлено много антигенов этой системы, но их иммуногенная сила разная. Существуют две основных номенклатуры обозначения антигенов этой системы: по Ландштейнеру и Винеру и по Фишеру Р. и Раису Р. Современная номенклатура - это совмещение двух номенклатур.

Современный вариант: Rho (D): rh" (C): rh" (E): Ню (d): hr" (c): hr" (e)

Наиболее активным в антигенном отношении является антиген D, в меньшей степени - С и Е, а тем более d, с, е. Реципиент имеет резус-положительную кровь, если его эритроциты обязательно содержат антиген D. Антиген D выявляется у 86% людей, С - у 70,8%, Е - у 31,0%, d - у 99%, с - у 84%, е - у 86%. Учитывая, что антиген D определяет принадлежность людей к группе резус-положительных, таких людей среди европейцев много - 86%, у представителей монгольской расы - 100%.

Антиген D является основной причиной сенсибилизации (иммунизации) во время беременности и гемолитической болезни новорожденных, он легко проникает через плаценту.

В настоящее время известны и другие факторы резус-системы. Из них особый интерес представляет вариант фактора D, который обозначается D". Он не всегда определяется в эритроцитах, но в ответ на его введение у резус-отрицательного человека вырабатывается анти-D. Поэтому у резус-отрицательного человека необходимо определить и отсутствие антигена D".

В эритроците антигены системы резус находятся в виде группы антигенов. Наиболее частые комбинации такие: CDE - 16%, CDe - 53%, cDE - 15%, cde%. У аборигенов Австралии в эритроцитах не выявлен ни один представитель системы резус. Такой вариант называют резус-нуль.

Характеристика групп крови по системе АВО

Про системы групп крови, пожалуй, слышали все, но у большинства людей знания заканчиваются сведениями о групповой несовместимости и о том, что при переливании можно вливать только одноименную группу крови. Как правило, для человека, не связанного с медициной, этих знаний бывает достаточно, а тем, кому интересны особенности подразделения по системе ABO и причины различия групп, можно ознакомиться с дополнительным материалом.

Принципы деления по ABO

Система ABO группы крови основана на различном содержании на поверхности эритроцитов агглютиногенов A и B. А также на присутствии в плазме агглютининов a и b.

Выделяется 4 группы крови АВО и характеристики каждой основаны на соотношении агглютиногенов и агглютининов:

I - эритроцит не несет на своей поверхности агглютиногенов, зато в кровеносном русле содержится оба вида агглютининов. В этом случае обозначается группа крови ab0 или 0 (I). Считается, что это самый «древний» вид крови.
II - эритроцитарная поверхность содержит компонент A, при этом в плазме выявляется агглютинин b, обозначением станет A (II).
III - эритроцит является носителем элемента B, при этом в плазме будет содержаться только b, и обозначаться это будет как B (III).
IV - на поверхности эритроцитов имеются агглютиногены A и B, но при этом в составе плазмы совсем нет агглютининов. Ее принято обозначать AB (IV). Есть мнение о том, что это самая «молодая» кровь.

Таким образом, в крови человека могут присутствовать сочетания:

Но никогда не встречается сочетаний Aa или Bb.

Ученые строят теории относительно того, как связана данная система с психологическим типом человека, предрасположенностью его к тем или иным патологиям и т. п.

Именно агглютинация служит причиной гемотрансфузионного шока, который возникает при групповой несовместимости.

Немного о гемотрансфузионном шоке

Даже после того как была открыта система АВО группы крови, осложнения при гемотрансфузии раньше происходили довольно часто по причине того, что на ранних этапах не учитывалось значение агглютининов, а принимался во внимание только показатель агглютеногенов. Ранее считалось, что переливание группы крови АВ0 или 0 (I) допускается всем, в то время как AB (IV) можно вливать только для четвертой группы. Такое ошибочное мнение служило основной причиной осложнений после гемотрансфузии.

Постепенно в процессе лабораторных исследований было обнаружено, что одноименные агглютиногены и агглютинины при попадании в общей кровоток провоцируют следующую реакцию:

агглютинацию (склеивание) эритроцитов;
после агглютинации происходит гемолиз (разрушение) эритроцита и сильное повышение количества свободного гемоглобина в плазме;
изменение кровяной формулы приводит к эритропении и общей интоксикации организма из-за избыточного количества свободного гемоглобина.

Такое состояние называется гемотрансфузионным шоком и часто заканчивается гибелью больного из-за того, что нарушается полноценное кровоснабжение тканей, а организм из-за недостатка кислорода испытывает сильную гипоксию. В первую очередь от недостатка питания страдают жизненно важные органы - сердце и мозг.

До того как медиками были открыты и исследованы группы крови системы АВО, а также принципы из совместимости, гибель пациентов после переливания случалась довольно часто из-за гемотрансфузионного шока, возникавшего на фоне массивного разрушения эритроцитов.

Дополнительная информация о рисках переливания

Даже полная совместимость донора и рецепиента крови по системе АВО не дает 100% гарантии, что гемотрансфузия произойдет без осложнений.

Возникновение осложнений может быть связано со следующим:

Агглютиногены или агглютинины донора сильно отличаются по своему составу от одноименных у рецепиента и при попадании в организм вызывают иммунную реакцию. Несмотря на основное деление на группы, состав крови у каждого человека индивидуален, именно эти индивидуальные особенности вызывают иммунологические реакции при переливании.
Сильное различие в составе плазмы. Лабораторные исследования проверяют только соотношения основных биохимических компонентов, многие показатели при этом не учитываются. Такое несовпадение также может послужить причиной острого иммунного ответа.

Но бывают ситуации, когда переливание необходимо по жизненным показателям.

К ним относятся:

тяжелые формы анемий;
обширные кровопотери при травмах или операциях:
снижение свертываемости;
онкологические процессы;
тяжелые ожоги.

Современная медицина в зависимости от возникшего состояния больного рекомендует делать не полную гемотрансфузию, а вливать пациенту отдельные компоненты крови:

Эритроцитарная масса. Готовится из донорской крови и содержит только «отмытые» эритроциты, несущие минимум информации о доноре. Эритроцитарная масса применяется для лечения анемий, онкологических процессов системы кроветворения или при кровопотерях.
Тромбоцитарная масса. Обезличенные донорские тромбоциты переливают при нарушении свертываемости.
Лейкоцитарная масса. Помогает восполнить количество лейкоцитов при онкологических заболеваниях, связанных с угнетением лейкоцитарного ростка и при других состояниях, сопровождающихся лейкопенией.
Плазма. Вливание плазмы проводится в основном при сильных ожогах, во время других заболеваний плазмотрансфузия применяется редко.

Для подбора совместимых элементов крови также используется система АВО, но при этом гемотрансфузионные осложнения встречаются значительно реже.

Во всех других случаях сочетание агглютининов и агглютиногенов не влияет на общее состояние здоровья человека.

Группа крови ABO

Группа крови ABO – это система, отражающая наличие или отсутствие антигенов на поверхности эритроцитов и антител в плазме крови. Определение группы крови имеет огромное значение при переливании крови и ее компонентов.

Группа крови, определение группы крови.

ABO Grouping, Blood Typing, Blood Group, Blood Type.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона жирную пищу за 24 часа до исследования.
Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Группа крови АВO – это система, отражающая наличие или отсутствие антигенов на поверхности эритроцитов и антител в плазме крови. ABO (читается как «а-бэ-ноль») является самой распространенной системой групп крови в России.

Эритроциты на своей поверхности несут сигнальные молекулы – антигены - агглютиногены. Двумя основными антигенами, встроенными в молекулу эритроцитов, являются А и В. Группы крови определяются на основании наличия или отсутствия этих антигенов. Кровь людей, у которых на эритроцитах присутствует антиген А, относится к второй группе – A (II), кровь тех, у кого на эритроцитах – антиген В, относится к третьей группе – B (III). Если на эритроцитах присутствуют и антигены А, и антигены В – это четвертая группа – AB (IV). Бывает и так, что в крови на эритроцитах не определяется ни одного из этих антигенов – тогда это первая группа – O (I).

В норме организм вырабатывает антитела против тех антигенов (А или В), которых нет на эритроцитах – это агглютинины находящиеся в плазме крови. То есть у лиц со второй группой крови – А(II) – на эритроцитах присутствуют антигены A, а в плазме будут содержаться антитела к антигенам В – обозначаются как анти-B (бета-агглютинин). Так как одноименные антигены (агглютиногены) на поверхности эритроцитов и агглютинины в плазме (A и альфа, B и бета) вступают друг с другом в реакцию и приводят к «склеиванию» эритроцитов, они не могут содержаться в крови у одного человека.

Открытие групповой системы ABO позволило понять, почему переливание крови иногда происходило удачно, а иногда вызывало тяжелые осложнения. Было сформулировано понятие совместимости групп крови. Например, если человеку со второй группой крови – А(II), которая содержит антитела к антигену В, перелить третью группу крови – B (III), произойдет реакция между антигенами и антителами, которая приведет к склеиванию и разрушению эритроцитов и может иметь тяжелые последствия вплоть до летального исхода. Поэтому группы крови при переливании обязательно должны быть совместимы.

Группа крови определяется по наличию или отсутствию склеивания эритроцитов с использованием сывороток, содержащих стандартные антигены и антитела.

В центрах переливания крови на пакетах с кровью или с ее компонентами, полученными от доноров, помечается «O (I)», «A (II)», «B (III)» или «AB (IV)», что позволяет быстро найти кровь нужной группы, когда она требуется.

Для чего используется исследование?

Чтобы узнать, какую кровь можно безопасно переливать пациенту. Крайне важно убедиться, что донорская кровь совместима с кровью реципиента – человека, которому ее собираются переливать. Если в донорской крови или ее компонентах есть антитела к антигенам, содержащимся на эритроцитах реципиента, то может развиться тяжелая трансфузионная реакция, вызванная разрушением эритроцитов в сосудистом русле.

Когда назначается исследование?

Перед переливанием крови – как тем, кому оно требуется, так и донорам.

Переливание крови и ее компонентов чаще всего требуется в следующих ситуациях:

- тяжелая анемия,
- кровотечение, возникшее во время или после операции,
- тяжелые травмы,
- массивная кровопотеря любого происхождения,
- онкологические заболевания и побочные эффекты химиотерапии,
- нарушения свертываемости крови, в частности гемофилия.
Перед хирургическим вмешательством.

Результаты показывают принадлежность крови человека к одной из четырех групп, в зависимости от наличия антигенов на эритроцитах и антител, присутствующих в крови.

Антител α и β не будет

Что может влиять на результат?

Гемолиз сыворотки способен делать результаты недостоверными.

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, гематолог, трансфузиолог, хирург.

СИСТЕМА АВО

Под группами крови системы АВО подразумеваются различные сочетания антигенных свойств эритроцитов (агглютиногенов) и антител (агглютининов), находящихся в плазме. Существует 2 агглютиногена А и В и два агглютинина альфа (α) и бета (β), которые в настоящее время обозначаются как анти-Аи анти-В.

Агглютиногены системы АВО по химической природе представляют собой полипептиды, состоящие из расположенных цепочкой многочисленных аминокислот. Строение каждого агглютиногена определяется составом этих аминокислот, а также числом и формой полипептидных цепочек. Агглютиногены в эритроцитах связаны с его стромой, гемоглобин в реакции агглютинации не участвует. Можно говорить, что агглютиногены располагаются на мембране эритроцита. Схематично это представлено в таблице 1.

Эритроциты с агглютиногенами системы АВО. Таблица 1

Агглютинины –это белкинаходящиеся в плазме, а точнее в α и β глобулиновых фракциях.

Схематично агглютинины системы АВО представлены в таблице 2.

Агглютинины плазмы системы АВО. Таблица 2

У человека не может быть сочетания одноименных агглютиногенов и агглютининов (например, А и анти-А). При встрече одноименного агглютиногена с одноименным агглютинином происходит реакция агглютинации эритроцитов (склеивания агглютининов и агглютиногенов) с последующим гемолизом (разрушением) эритроцитов, выходом гемоглобина из эритроцитов в плазму крови. Кровь становится токсичной и не может выполнять своей дыхательной функции. Схематично реакция агглютинации и гемолиза при встрече одноименных агглютининов и агглютиногенов (при переливании крови без учета системы АВО) показана на рисунке 7. Объяснения ниже.

Рис. 7. Агглютинация и гемолиз эритроцитов

На рисунке в верхней части обозначена встреча одноименных агглютининов и агглютиногенов и их агглютинация (склеивание). В дальнейшем запускаются механизмы разрушающие мембрану эритроцита, его фрагментацию и выход гемоглобина в плазму – нижняя часть рисунка обозначенная как гемолиз.

Различные сочетания агглютиногенов и агглютинов позволяют выделить четыре группы крови по системе АВО. Первая группа крови характеризуется тем, что в ее эритроцитах отсутствуют агглютиногены АиВ, а в сыворотке содержаться оба агглютинина aи b (анти-А, анти-В).Следовательно, в зависимости от состава агглютинитов и агглютиногенов формула крови первой группы обозначается 0 a b (0 анти-А, анти-В)В эритроцитах второй группы крови содержится агглютиноген А, а в сыворотке – агглютинин b (анти-В).Соответственно формула этой группы обозначается А b (А анти-в).В крови третьей группы крови эритроциты имеют агглютиноген В,а сыворотка – агглютинин a (анти-А).Формула крови – В a (В анти-А). Четвертая группа крови характеризуется тем, что ее эритроциты содержат оба агглютиногена АиВ,а ее сыворотка агглютининов aиb (анти-А, анти-В)не содержит. Формула крови – АВ 0 .

Схематично группы крови по системе АВО представлены в таблице 3.

Группы крови по системе АВО. Таблица 3

В 1928 году гигиенической секцией Лиги Наций для обозначения групповой принадлежности крови была принята буквенная номенклатура, отражающая агглютиногенный состав, используемая в настоящее время во всем мире (международная номенклатура).

Приводим для сравнения номенклатуры группы крови (таблица 4).

Номенклатуры групп крови. Таблица 4

В клинической практике принято следующее написание групп крови.

Группа крови человека постоянна и с возрастом не меняется. Распределение групп крови среди населения нашей страны следующее: первая – 32%, вторая – 40%, третья – 20%, четвертая – 8%.

Необходимо отметить, что исследования Дунгерна и Гиршфельда (1911) установили, что антиген А не является однородным и может быть разделен на две подгруппы. Ландштейнер и Винер (1930) обозначили их А 1 и А 2 . Таким образом, группа крови А подразделяется на два варианта и в системе АВО получается не четыре, а шесть групп крови. До настоящего времени в нормативных документах при определении групп крови это не учитывается. Тем не менее, необходимо помнить, что эритроциты группы А 1 обладают выраженной агглютинабельностью и поэтому реагируют с соответствующими сыворотками, взятыми даже в небольшом разведении. Эритроциты же группы А 2 агглютинируются слабее и лишь при применении достаточно активных сывороток и при небольшом их разведении. Таким образом, при отсутствии достаточно активных сывороток носители группы А 2 могут быть ошибочно отнесены в группу О, а лица группы А 2 В – к группе В.

Эритроциты группы А 1 встречаются в 88%, а группы А 2 – в 12% среди лиц, относящихся к группе А.

Группы крови аво

и подростковая гинекология

и доказательная медицина

и медицинскому работнику

Систему группы крови АВО составляют два групповых агглютиногена - А и В и два соответствующих агглютинина в плазме - альфа (анти-А) и бета (анти-В). Различные сочетания этих антигенов и антител образуют четыре группы крови: группа 0(1) - оба антигена отсутствуют; группа А(II) - на эритроцитах присутствует только антиген А; группа В(III) - на эритроцитах присутствует только антиген В; группа АВ (IV) - на эритроцитах присутствуют антигены А и В.

Уникальность системы АВО состоит в том, что в плазме у неиммунизированных людей имеются естественные антитела к отсутствующему на эритроцитах антигену: у лиц группы 0(1) - антитела к А и В; у лиц группы А(II) - анти-В-антитела; у лиц группы В(III) - анти-А-антитела; у лиц группы АВ(IV) нет антител к антигенам системы АВО.

В последующем тексте анти-А- и анти-В-антитела будут обозначаться как анти-А и анти-В.

Определение группы крови АВО проводят путем идентификации специфических антигенов и антител (двойная или перекрестная реакция). Анти-А и анти-В выявляют в сыворотке крови с помощью стандартных эритроцитов А(II) и В(III). Наличие или отсутствие на эритроцитах антигенов А и В устанавливают при помощи моноклональных или поликлональных антител (стандартных гемагглютинирующих сывороток) соответствующей специфичности.

Определение группы крови проводят дважды: первичное исследование - в лечебном отделении (бригаде заготовки крови); подтверждающее исследование - в лабораторном отделении. Алгоритм проведения иммуногематологических лабораторных исследований при переливании крови представлен на рис. 18.1.

Результат определения группы крови записывается в правом верхнем углу лицевого листа истории болезни или в донорский журнал (карту)с указанием даты и за подписью врача, производившего определение.

На северо-западе России распределение групп крови системы АВО в популяции следующее: группа 0(I) - 35%; группа А(II)%; группа В(III)%; группа АВ (IV)%.

Следует отметить, что существуют различные виды (слабые варианты) как антигена А (в большей степени), так и антигена В. Наиболее часто встречаются виды антигена А - А 1 и А 2 . Распространенность антигена А 1 у лиц групп А(II) и АВ(IV) составляет 80%, а антигена А 2 - около 20%. Образцы крови с А 2 могут содержать анти-А 1 -антитела , взаимодействующие со стандартными эритроцитами группы А(II). Наличие анти-А 1 выявляется при перекрестном определении групп крови и при проведении пробы на индивидуальную совместимость.

Для дифференцированного определения вариантов антигена А (А 1 и А 2) необходимо использовать специфические реагенты (фитогемагглютинины или моноклональные антитела анти-А 1 . Пациентам групп А 2 (II) и А 2 В(IV) нужно переливать эритроцитосодержащие гемокомпоненты, соответственно, групп А 2 (II) и А 2 В(IV). Также могут быть рекомендованы трансфузии отмытых эритроцитов: 0(I) - пациентам с группой крови А 2 (II); 0(I) и В(III) - пациентам с группой крови А 2 В(II).

Определение групповой принадлежности крови по системе АВО

Группы крови определяют по стандартным сывороткам (простая реакция) и стандартным эритроцитам (двойная или перекрестная реакция).

Группу крови простой реакцией определяют обязательно двумя сериями стандартных изогемагглютинирующих сывороток.

Ход определения [показать] .

Определение группы крови производят при хорошем освещении и температуре от + 15 до + 25°С на планшетах. На левой стороне планшета надписывают 0(1), в середине - А(II), на правой стороне - В(III). В середине верхнего края планшета отмечают фамилию донора или номер исследуемой крови. Используют активные стандартные сыворотки трех групп (О, А, В) с титром не ниже 1:32, двух серий. Сыворотки располагают в специальных штативах в два ряда. Каждой сыворотке соответствует маркированная пипетка. Для дополнительного контроля используют сыворотку группы АВ(IV).

На планшет наносят по одной - две капли стандартных сывороток в два ряда: сыворотку группы 0(1) - слева, сыворотку группы А(II) - в середину, сыворотку группы В(III) - справа.

Капли крови из пальца или пробирки наносят пипеткой или стеклянной палочкой около каждой капли сыворотки и смешивают палочкой. Количество крови должно быть в 8-10 раз меньше, чем сыворотки. После смешивания тарелку или планшет осторожно покачивают в руках, что способствует более быстрой и четкой агглютинации эритроцитов. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин, к каплям сыворотки с эритроцитами, где наступила агглютинация, добавляют по одной капле 0,9% раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение до истечения 5 мин. Через 5 мин читают реакцию в проходящем свете.

Если агглютинация нечеткая, к смеси сыворотки и крови дополнительно добавляют по одной капле 0,9% раствора хлорида натрия, после чего дают заключение о групповой принадлежности (табл. 18.4).

Отсутствие агглютинации во всех трех каплях указывает на то, что в исследуемой крови нет агглютиногена, то есть кровь относится к группе 0(I).
Наступление агглютинации в каплях с сыворотками 0(I) и В(III) указывает на то, что в крови имеется аггглютиноген А, то есть кровь относится к группе А(II).
Наличие агглютинации в каплях с сыворотками группы 0(I) и А(II) указывает на то, что в исследуемой крови имеется агглютиноген В, то есть кровь группы В(III).
Агглютинация во всех трех каплях указывает на наличие в исследуемой крови агглютиногенов А и В, то есть кровь относится к группе АВ(IV). Однако в этом случае, учитывая, что агглютинация со всеми сыворотками возможна за счет неспецифической реакции, необходимо нанести на планшет или тарелку две-три капли стандартной сыворотки группы АВ(IV) и добавить к ним 1 каплю исследуемой крови. Сыворотку и кровь перемешивают и результат реакции наблюдают в течение 5 мин.

Если агглютинация не наступила, то исследуемую кровь относят к группе АВ(IV). Если же агглютинация появляется с сывороткой группы АВ(IV), значит, реакция неспецифическая. При слабой агглютинации и во всех сомнительных случаях кровь заново проверяют со стандартными сыворотками других серий.

Определение группы крови АВО двойной реакцией

(по стандартным сывороткам и стандартным эритроцитам)

Стандартные эритроциты представляют собой 10-20% взвесь свежих нативных эритроцитов (или отмытых от консерванта тест-клеток) группы 0(I), А(II) и В(III) в 0,9% растворе хлорида натрия или цитратно-солевом растворе. Нативные стандартные эритроциты могут быть использованы в течение 2-3 дней при условии хранения их в изотоническом солевом растворе при температуре +4°С. Консервированные стандартные эритроциты хранят при температуре +4°С в течение 2-х месяцев и отмывают от консервирующего раствора перед использованием.

Ампулы или флаконы со стандартными сыворотками и стандартными эритроцитами располагают в специальных штативах с соответствующей маркировкой. Для работы с типирующими реагентами используют сухие чистые пипетки, отдельные для каждого реагента. Для промывания стеклянных (пластмассовых) палочек и пипеток подготавливают стаканы с 0,9% раствором хлорида натрия.

Для определения группы берут 3-5 мл крови в пробирку без стабилизатора. Кровь должна отстояться в течение 1,5-2 ч при температуре + 15-25° С.

Ход определения [показать] .

На планшет наносят по две капли (0,1 мл) стандартных сывороток групп 0(I), А(II), В(III) двух серий. Соответственно каждой группе сывороток располагают по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп 0(I), А(II), В(III). В стандартные сыворотки добавляют по одной капле исследуемой крови, а в стандартные эритроциты - по две капли исследуемой сыворотки. Количество крови должно быть в 8-10 раз меньше, чем сыворотки. Капли перемешивают стеклянной палочкой и, покачивая планшет в руках в течение 5 мин, следят за наступлением агглютинации. Если агглютинация нечеткая, к смеси сыворотки и крови дополнительно добавляют по одной капле 0,9% раствора хлорида натрия (0,1 мл), после чего делают заключение о групповой принадлежности (табл. 18.4).

Наличие агглютинации со стандартными эритроцитами А и В и отсутствие агглютинации в трех стандартных сыворотках двух серий указывает на то, что в исследуемой сыворотке присутствуют оба агглютинина - альфа и бета, а в исследуемых эритроцитах нет агглютиногенов, то есть кровь относится к группе 0(I).
Наличие агглютинации со стандартными сыворотками групп 0(I), В(III) и со стандартными эритроцитами группы В(III) указывает на то, что в исследуемых эритроцитах имеется агглютиноген А, а в исследуемой сыворотке - агглютинин бета. Следовательно, кровь относится к группе А(II).
Наличие агглютинации со стандартными сыворотками групп 0(I), А(II) и со стандартными эритроцитами группы А(II) указывает на то, что в исследуемых эритроцитах имеется агглютиноген В, а в исследуемой сыворотке - агглютинин альфа. Следовательно кровь относится к группе В(III).
Наличие агглютинации со всеми стандартными сыворотками и отсутствие агглютинации со всеми стандартными эритроцитами указывает на то, что в исследуемых эритроцитах имеются оба агглютинина, то есть кровь относится к группе АВ(IV).

Определение групповой принадлежности крови

с использованием цоликлонов анти-А и анти-В

Цоликлоны анти-А и анти-В (моноклональные антитела к антигенам А и В) предназначены для определения группы крови системы АВО человека взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Для каждого определения группы крови применяют по одной серии реагента анти-А и анти-В.

Ход определения [показать] .

На планшет (пластинку) наносят по одной большой капле цоликлонов анти-А и анти-В (0,1 мл) под соответствующими надписями: "Анти-А" или "Анти-В". Рядом помещают по одной маленькой капле исследуемой крови (соотношение кровыреагент - 1:10), затем реагент и кровь смешивают и наблюдают за ходом реакции при легком покачивании планшета или пластинки.

Агглютинация с цоликлонами анти-А и анти-В обычно наступает в первые 5-10 с. Наблюдение следует вести 2,5 мин, ввиду возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

При подозрении на спонтанную агглютинацию у лиц с группой крови АВ(IV) проводят контрольное исследование с 0,9% раствором хлорида натрия. Реакция должна быть отрицательной.

Цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета) выпускаются как в нативной, так и лиофилизированной форме в ампулах по 20, 50, 100 и 200 доз с растворителем, приложенным к каждой ампуле, по 2, 5, 10, 20 мл соответственно.

Дополнительным контролем правильности определения группы крови АВО реагентами анти-А и анти-В является моноклональный реагент анти-АВ ("Гематолог", Москва). Реагент анти-АВ целесообразно использовать параллельно как с иммунными поликлональными сыворотками, так и с моноклональными реагентами. В результате реакции с реагентом анти-АВ развивается агглютинация эритроцитов групп А(II), В(III) и АВ(IV); у эритроцитов группы 0(I) агглютинация отсутствует.

ОШИБКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ

Ошибки при определении групп крови могут зависеть от трех причин:

технических;
неполноценности стандартных сывороток и стандартных эритроцитов;
биологических особенностей исследуемой крови.

К ошибкам по техническим причинам относятся:

а) неправильное расположение сывороток на планшете;
б) неправильные количественные соотношения сывороток и эритроцитов;
в) применение недостаточно чистых планшетов и других предметов, соприкасающихся с кровью. Для каждой сыворотки должна быть отдельная пипетка; для промывания пипеток следует применять только 0,9% раствор хлорида натрия;
г) неправильная запись исследуемой крови;
д) несоблюдение положенного для реакции агглютинации времени; при поспешности, когда реакцию учитывают до истечения 5 мин, агглютинация может не наступить, если в исследуемой крови имеются слабые агглютиногены; при передержанной более 5 мин реакции может произойти подсыхание капель с краев, симулирующее агглютинацию, что также поведет к ошибочному заключению;
е) отсутствие агглютинации из-за высокой (выше 25°С) температуры окружающего воздуха. Во избежание этой ошибки целесообразно использовать специально приготовленные сыворотки для работы в условиях жаркого климата; производить определение групп крови на тарелке или пластмассовом подносе, внешняя поверхность дна которых опущена в холодную воду.
ж) неправильное центрифугирование: недостаточное может привести к ложноотрицательному результату, а избыточное - к ложноположительному.

Ошибки, зависящие от применения неполноценных стандартных сывороток и стандартных эритроцитов:

а) слабые стандартные сыворотки с титром ниже чем 1:32 или с истекшим сроком годности могут вызывать позднюю и слабую агглютинацию;
б) применение негодных стандартных сывороток или эритроцитов, которые были приготовлены нестерильно и недостаточно законсервированы, ведет к возникновению неспецифической "бактериальной" агглютинации.

Ошибки, зависящие от биологических особенностей исследуемой крови:

Ошибки, зависящие от биологических особенностей исследуемых эритроцитов:

а) поздняя и слабая агглютинация объясняется "слабыми" формами антигенов, эритроцитов, чаще - наличием в группах А и АВ слабого агглютиногена А 2 . При этом, в случае определения группы крови без исследования сыворотки на наличие агглютининов (простая реакция) могут наблюдаться ошибки, вследствие которых кровь группы А 2 В определяют как группу В(III), а кровь А 2 - как группу 0(I). Поэтому, во избежание ошибок, определение группы крови как доноров, так и реципиентов необходимо проводить с использованием стандартных эритроцитов (двойная или перекрестная реакция). Для идентификации агглютиногена А 2 рекомендуется повторить исследование с другими видами (сериями) реагентов, используя другую лабораторную посуду, с увеличением времени регистрации реакции.

Специфическими реагентами уточнения группы крови при наличии слабых вариантов антигена А (А 1 , А 2 , А 3) методом прямой реакции агглютинации являются цоликлон анти-А сл и реагент анти-А).

б) "панагглютинация" или "аутоагглютинация", то есть способность крови давать одинаковую неспецифическую агглютинацию со всеми сыворотками и даже со своей собственной. Интенсивность подобной реакции после 5 мин ослабевает, в то время как истинная агглютинация усиливается. Наиболее часто встречается у гематологических, онкологических больных, обожженных и др. Для контроля рекомендуется оценить, происходит ли агглютинация тестируемых эритроцитов в стандартной сыворотке группы АВ (IV) и физиологическом растворе.

Группа крови при "панагглютинации" может быть определена после трехкратного отмывания эритроцитов. Для устранения неспецифической агглютинации планшет помещают в термостат при температуре +37°С на 5 мин, после чего неспецифическая агглютинация исчезает, а истинная остается. Целесообразно повторить определение с использованием моноклональных антител, постановки пробы Кумбса.

В том случае, когда отмывание эритроцитов не дает желаемого результата, необходимо произвести повторное взятие образца крови в предварительно согретую пробирку, поместить пробу в термоконтейнер для поддержания температуры +37°С и доставить в лабораторию на исследование. Определение группы крови необходимо производить при температуре +37°С, для чего используют предварительно подогретые реактивы, физиологический раствор и планшет.

в) эритроциты тестируемой крови складываются в "монетные столбики", которые при макроскопии можно принять за агглютинаты. Прибавление 1-2 капель изотонического раствора хлорида натрия с последующим мягким покачиванием планшета, как правило, уничтожает "монетные столбики".

г) смешанная или неполная агглютинация: часть эритроцитов агглютинирует, а часть остается свободной. Наблюдается у пациентов групп А(II), В(III) и АВ(IV) после трансплантации костного мозга или в течение первых трех месяцев после переливания крови группы 0(I). Разнородность эритроцитов периферической крови четко верифицируется в гелевом тесте DiaMed.

Ошибки, зависящие от биологических особенностей исследуемой сыворотки:

а) выявление антител другой специфичности при рутинном тестировании является результатом предшествующей сенсибилизации. Целесообразно определить специфичность антител и подобрать типированные эритроциты без антигена, к которому выявлена иммунизация. Иммунизированному реципиенту обязателен индивидуальный подбор совместимой донорской крови;
б) при выявлении образования "монетных столбиков" стандартных эритроцитов в присутствии тестируемой сыворотки аномальный результат целесообразно подвердить, используя стандартные эритроциты группы 0(I). Для дифференцировки "монетных столбиков" и истинных агглютинатов добавляют 1-2 капли изотонического раствора хлорида натрия и покачивают планшет, при этом "монетные столбики" разрушаются;
в) отсутствие анти-А- или анти-В-антител. Возможно у новорожденных и пациентов с угнетением гуморального иммунитета;
г) агглютинация стандартных эритроцитов, в том числе группы 0(I) в присутствии исследуемой сыворотки связана с присутствием специфических и неспецифических холодовых антител. Исчезновение агглютинации при проведении исследования при температуре +37°С верифицирует неспецифические холодовые агглютинины. Если исследуемая сыворотка взаимодействует с некоторыми образцами эритроцитов группы 0(I) - это свидетельствует о присутствии в сыворотке специфических холодовых антител. Для установления специфичности антител проводят тестирование с панелью эритроцитов, типированных по системам Р, МNS и др.

Иммунологический подбор донора и реципиента при переливаниях крови, ее компонентов и трансплантациях костного мозга / Сост. Шабалин В. Н., Серова Л. Д., Бушмарина Т.Д. и др.- Ленинград, 1979.- 29 с.
Калеко С. П., Серебряная Н. Б., Игнатович Г. П. и др. Аллосенсибилизация при гемокомпонентной терапии и оптимизация подбора гистосовместимых пар "донор-реципиент" в военных лечебных учреждениях/ Методич. рекомендации.- С.-Петербург, 1994.- 16 с.
Практическая трансфузиология / Ред. Козинец Г. И., Бирюкова Л. С., Горбунова Н.А. и др.- Москва: Триада-Т, 1996.- 435 с.
Руководство по военной трансфузиологии / Ред. Э. А. Нечаев. - Москва, 1991.с.
Руководство по трансфузионной медицине / Под ред. Е. П. Сведенцова. - Киров, 1999.- 716с.
Румянцев А. Г., Аграненко В. А. Клиническая трансфузиология.- М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1997.- 575 с.
Шевченко Ю.Л., Жибурт Е.Б., Безопасное переливание крови: Руководство для врачей.- СПб.: Питер, 2000.- 320 с.
Шевченко Ю.Л., Жибурт Е.Б., Серебряная Н.Б. Иммунологическая и инфекционная безопасность гемокомпонентной терапии.- СПб.: Наука, 1998.- 232 с.
Шиффман Ф.Дж. Патофизиология крови / Пер. с англ.- М.- СПб.: Издательство БИНОМ - Невский диалект, 2000.- 448 с.
Blood transfusion in Clinical Medicine / Ed. P.L.Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988.p.

Антигенная система АВО имеет основное значение в совместимости крови при переливании.
Под термином «совместимость» понимают сочетание крови донора и реципиента по антигенам и антителам, не вызывающее иммунологических взаимодействий.

редкого ангглютиногена А2. В соответствии с этим группа А (II) имеет две подгруппы А (II) и А2 (II), а группа АВ (IV) - АВ (IV) и А2В (IV) (табл.6.1).
Таблица 6.1
Группы крови по системе АВО

Агглютиногены Aj и А2 отличаются друг от друга по свойствам:

Подтип А, обладает большей адсорбционной возможностью по сравнению с аггютиногеном А2, он сильнее адсорбирует агглютинин а из сыворотки, поэтому его называют сильным, а подтип А2 - слабым.
Эритроциты с агглютиногеном А2 имеют более низкую агглюти- набельность.
Подгруппы с агглютиногенами Aj и А2 обладают и различными свойствами сывороток. Сыворотка подгрупп А2(П) и А2В (IV) довольно часто содержит агглютинин, названный Ландштейнером и Левиным экстраагглютинином ар который дает агглютинацию только с эритроцитами Aj и не дает агглютинации с эритроцитами А2. В то же время в сыворотке подгрупп А (II) и АВ (IV) довольно редко, но встречается экстраагглютинин а2, не агглютинирующий с эритроцитами Aj, а дающий агглютинацию с эритроцитами А2.

Существуют варианты эритроцитов с еще более слабовыраженными агглютинабельными свойствами, что связано с наличием в них подтипов А3, А4, Az и др. Несмотря на то что эти слабые антигены встречаются довольно редко, они имеют определенное клиническое значение.

ПОДТИПЫ АНТИГЕНА В

Групповой антиген В отличается большей однородностью, хотя описаны редкие его варианты: В2, В3, Bw и др. Однако существенного клинического значения это не имеет. Применение высокоактивных стандартных сывороток позволяет выявить и эти слабовыраженные агглютиногены группы В.

АНТИГЕН О И СУБСТАНЦИЯ Н

Позже в первой группе крови О (I) была найдена специфическая субстанция, также обозначенная символом «О». Фактор О является агглю- тиногеном, присущим эритроцитам групп О (I), А2 (И), А2В (IV).
Для эритроцитов всех групп характерно наличие субстанции Н, считающейся общим веществом-предшественником. Субстанция Н чаще встречается у лиц с первой группой крови, в других же она содержится в незначительном количестве. У некоторых жителей индийского города Бомбей обнаружена группа, не содержащая агглютиногенов О, А, В, Н, но содержащая антитела а, р, анти-0 и анти-Н. Впоследствии этот редкий тип крови, обнаруженный и у жителей других стран, получил название «тип Бомбей».

КРОВЯНЫЕ ХИМЕРЫ

В настоящее время известны кровяные химеры, которые обусловлены одновременным пребыванием в организме человека эритроцитов, принадлежащих двум фенотипам АВО. В естественных условиях кровяной химеризм встречается у близнецов. Он может также появиться при пересадке аллогенного костного мозга, переливании массивных объемов крови. При определении группы крови и резус-принадлежности в условиях кровяного химеризма, как правило, получают искаженный результат.

В последующем тексте анти-А- и анти-В-антитела будут обозначаться как анти-А и анти-В.

На северо-западе России распределение групп крови системы АВО в популяции следующее: группа 0(I) - 35%; группа А(II) - 35-40%; группа В(III) - 15-20%; группа АВ (IV) - 5-10%.

Следует отметить, что существуют различные виды (слабые варианты) как антигена А (в большей степени), так и антигена В. Наиболее часто встречаются виды антигена А - А1 и А2. Распространенность антигена А1 у лиц групп А(II) и АВ(IV) составляет 80%, а антигена А2 - около 20%. Образцы крови с А2 могут содержать анти-А1-антитела , взаимодействующие со стандартными эритроцитами группы А(II). Наличие анти-А1 выявляется при перекрестном определении групп крови и при проведении пробы на индивидуальную совместимость.

Для дифференцированного определения вариантов антигена А (А1 и А2) необходимо использовать специфические реагенты (фитогемагглютинины или моноклональные антитела анти-А1. Пациентам групп А2(II) и А2В(IV) нужно переливать эритроцитосодержащие гемокомпоненты, соответственно, групп А2(II) и А2В(IV). Также могут быть рекомендованы трансфузии отмытых эритроцитов: 0(I) - пациентам с группой крови А2(II); 0(I) и В(III) - пациентам с группой крови А2В(II).

Определение групповой принадлежности крови по системе АВО

Ход определения . Определение группы крови производят при хорошем освещении и температуре от + 15 до + 25°С на планшетах. На левой стороне планшета надписывают 0(1), в середине - А(II), на правой стороне - В(III). В середине верхнего края планшета отмечают фамилию донора или номер исследуемой крови. Используют активные стандартные сыворотки трех групп (О, А, В) с титром не ниже 1:32, двух серий. Сыворотки располагают в специальных штативах в два ряда. Каждой сыворотке соответствует маркированная пипетка. Для дополнительного контроля используют сыворотку группы АВ(IV).

На планшет наносят по одной - две капли стандартных сывороток в два ряда: сыворотку группы 0(1) - слева, сыворотку группы А(II) - в середину, сыворотку группы В(III) - справа.

Результаты реакции

1. Отсутствие агглютинации во всех трех каплях указывает на то, что в исследуемой крови нет агглютиногена, то есть кровь относится к группе 0(I).

2. Наступление агглютинации в каплях с сыворотками 0(I) и В(III) указывает на то, что в крови имеется аггглютиноген А, то есть кровь относится к группе А(II).

3. Наличие агглютинации в каплях с сыворотками группы 0(I) и А(II) указывает на то, что в исследуемой крови имеется агглютиноген В, то есть кровь группы В(III).

4. Агглютинация во всех трех каплях указывает на наличие в исследуемой крови агглютиногенов А и В, то есть кровь относится к группе АВ(IV). Однако в этом случае, учитывая, что агглютинация со всеми сыворотками возможна за счет неспецифической реакции, необходимо нанести на планшет или тарелку две-три капли стандартной сыворотки группы АВ(IV) и добавить к ним 1 каплю исследуемой крови. Сыворотку и кровь перемешивают и результат реакции наблюдают в течение 5 мин.

15.Резус-фактор крови. Резус-фактор (Rh-фактор) - это белок крови, который содержится на поверхности клеток крови - эритроцитов. Если этот белок есть, то это означает, что у человека положительный резус-фактор, если же его нет - то отрицательный. Резус фактор определяется по антигену.

Резус-фактор находят в эритроцитах, а также в лейкоцитах, тромбоцитах, в разных органах и тканевых жидкостях, околоплодных водах. Если кровь с положительным резус-фактором попадает человеку с резус-отрицательной кровью (Rh-фактор отсутствует), то образуются специфические антитела - антирезус агглютинины; они могут образоваться у резус-отрицательной беременной от резус-положительного плода. В связи с этим может погибнуть ребенок или резус-отрицательный человек, если ему повторно переливают резус-положительную кровь. У резус-отрицательных женщин при беременности резус-положительным плодом может быть фатальным и первое переливание крови.

В последние годы доказано, что распределение людей на резус-положительных (примерно 85%) и резус-отрицательных (примерно 15%) весьма условно. Практическое значение при переливании крови имеют 6 антигенов системы Rh-Hr (D, С, Е, d, с, е). Первые три антигена являются разновидностями резус-фактора - D(Rh0), С(rh′), Е(rh″). Наиболее антигенен и является наиболее частой причиной изосерологических конфликтов при гемотрансфузиях и беременности антиген D(Rh0), наиболее слаб - Е(rh″). Поэтому при переливании крови необходимо предупредить введение антигена D(Rh0) с кровью донора реципиентам, этот антиген не имеющим. С этой точки зрения резус-принадлежность у реципиентов определяют по наличию антигена D(Rh0), а другие антигены системы Rh-Hr не учитываются.

Если у доноров определять резус-принадлежность по тому же принципу, что и у реципиентов, то оказывается, что в 2-3% случаев резус-отрицательная донорская кровь содержит в эритроцитах антигены С(rh′) и Е(rh″). В связи с этим к группе доноров с резус-отрицательной кровью должны относиться только лица, в эритроцитах которых нет антигенов D(Rh0), С(rh′) и Е(rh″). Это обстоятельство имеет существенное значение, так как лицо, в эритроцитах которого обнаружены антигены С(rh′) или Е(rh″), будучи донором, относится к группе резус-положительной, но, будучи реципиентом, должно считаться резус-отрицательным, ибо отсутствует антиген 0.

Таким образом в крови индивидуума может быть один тип резус-фактора или комбинация из нескольких типов, причем каждый из типов резус-фактора вызывает образование специфических антител.

В эритроцитах есть также антигены системы Hr-Hr0, rh′, rh″, которые вызывают образование специфических антител, однако их антигенные свойства слабее, чем у резус-фактора. Наиболее частой причиной иммунизации оказывается антиген rh′(с), наименее антигенны rh″(е) и Hr0(d). Все лица с резус-отрицательной кровью одновременно являются Hr-положительными, если имеют антиген rh′(с). Наличие антигена Нr заставляет предостеречь от трансфузий резус-отрицательной крови реципиентам с резус-положительной кровью или вообще без определения резус-принадлежности больного, так как можно вызвать иммунизацию или посттрансфузионное осложнение по антигену rh′(с), если больной окажется Hr-отрицательным.

По современным представлениям (Fischer, Rасе), резус-система, по сути, комплекс шести антигенов Rh-Hr систем, связанных в одной паре хромосом. У человека могут быть антигены обеих систем (Rh и Hr) или только одной системы (Rh или Hr), но нет таких людей, у которых не было бы одной из этих двух антигенных систем. В настоящее время известны 27 комбинаций типов антигенов.

Перед переливанием крови обязательно следует установить резус-принадлежность донора и реципиента и провести пробу на резус-совместимость. При переливании крови следует строго придерживаться принципа использования крови, одноименной по резус-фактору.

Около 80 % людей имеют I и II группы крови, 15 % - III и 5 % - IV группу крови. Отдавать свою кровь для переливания, т. е. быть донором, может каждый здоровый человек. Донорство приносит пользу не только больным, которым переливание крови иногда спасает жизнь, но и самому донору. Взятие небольшого количества крови у человека (200-250 мл) усиливает деятельность кроветворных органов.

И по группам крови MN. Чаще всего вопросы очень простые, ответить на них можно «в одно действие».

Но почему же они возникают?

Дело в том, что в сознании большинства людей по крайней мере две характеристики: 1) группы крови человека по системе АВО и 2) резус-фактор — слиты воедино (вообще-то биохимических характеристик крови человека ученые обнаружили еще около 30, но они не являются важными при переливании крови).

Из следующих иллюстраций видно, что резус-фактор — это совершенно отдельная от групп крови по системе АВО характеристика.

Так вот, если у родителей или судмедэкспертов встает вопрос, может ли быть тот или иной ребенок с такими-то характеристиками группы крови по системе АВО и резус-фактору, быть родным, удобнее рассматривать эти два показателя совершенно раздельно.

При беременности, например, если группы крови матери и плода по системе АВО вовсе не следует учитывать, то разные резус-факторы могут сказаться на здоровье плода.

Однако в этой статье приводятся вопросы читателей и мои ответы на них в том виде как они были представлены в комментариях.

1. Скажите, если у меня I+, а у мужа II+, может ли наша дочь иметь II-?

Да, может быть. Если по резус-фактору оба родителя гетерозиготны Rr, то может родиться ребенок резус-отрицательный с генотипом rr. А по группам крови может быть ребенок с I или со II группой, так как Ваш генотип ОО, а у мужа АО или АА и у вас могут быть дети ОО, либо АО.

2. Скажите, если у матери 4-, а у отца 3+, может у них родиться ребёнок со 2-?

Да, может быть. Например, если генотип матери ABrr, отца BORr, то возможно рождение ребенка с генотипом AOrr.

3. У мужа третья отрицательная группа крови, у его мамы первая положительная, у папы вторая положительная. Разве такое возможно?

По резус-фактору такое возможно. Значит оба родителя вашего мужа по резус-фактору гетерозиготны Rr и Rr. А вот от родителей с первой группой крови (генотип OO) и со второй группой крови (генотип AA или AO) в норме не может родиться ребенок с третьей группой крови (с генотипом BB или BO). Пишу «в норме», то есть в отсутствие бомбейского феномена.

4. Какую кровь унаследуют дети, если отец имеет резус-положительную кровь II группы, а мать резус-отрицательную IV группы?

Генотип матери мы можем сразу записать однозначно. Он будет таким АВrr. А генотип отца может иметь 4 варианта записи, поэтому в этой задаче будет 4-ре варианта решения.
1) P: ABrr x AARR. G: матери Ar, Br и отца AR. F: AARr, ABRr (все дети с резус-положительной кровью со 2-й или 4-й группами крови).
2) P: ABrr x AORR. G: матери Ar, Br и отца AR, OR. F: AARr, AORr, ABRr, BORr (все дети с резус-положительной кровью со 2-й, 4-й или 3-й группами крови).
3) P: ABrr x AARr. G: матери Ar, Br и отца AR, Ar. F: AARr, AArr, ABRr, ABRrr (резус-положительные со 2-й группой, резус-отрицательные со 2-й группой, резус-положительные с 4-й группой, резус-отрицательные с 4-й группой).
4) P: ABrr x AORr. G: матери Ar, Br и отца AR, Ar, OR, Or. F: AARr, AArr, ABRr, ABRrr (резус-положительные со 2-й группой, резус-отрицательные со 2-й группой, резус-положительные с 4-й группой, резус-отрицательные с 4-й группой, резус-положительные с 3-й группой, резус-отрицательные с 3-й группой).

5. Если у папы 1 положительная а у мамы 4 положительная у ребенка может быть 4 положительная?

По резусу противоречий нет. А вот по группам крови у данных родителей не может родиться ребенок с 4-й группой крови, так как отец с 1-й группой имеет генотип ОО, мать с 4-й группой имеет генотип АВ и их ребенок поэтому может быть АО (2-я группа) или ВО (3-я группа). Но следует знать, что в Индии был обнаружен

так называемый Бомбейский феномен .

Он обнаружен только у определенной популяции людей (кто знает, может быть он существует где-нибудь в мире и еще).

Суть феномена в том, что за группу крови по системе АВО отвечают не только сами аллели генов (О, А, В, от которых группа крови и зависит), а еще и ген h (проявляющийся в рецессивном состоянии).

Поэтому, можно предположить, если у отца с 1-й группой крови (установленной по биохимическому анализу) фактически имеются аллели А и В, но не проявившие себя из-за эпистаза, то ребенок может иметь 4-ю группу крови.

6. У меня кровь 2 группы, у жены 1 группа. Родился сын с 4 группой.Может ли быть такое?

Нет, теоретически такого быть не может. Но исключения бывают (Бомбейский феномен тому пример).

7. Определите вероятность рождения ребенка со 2 группой крови, если родители имеют 4 группу крови?

У родителей с 4-й группой крови генотип может быть только АВ. Всевозможные генотипы потомков АА, 2АВ, ВВ. Значит, вероятность рождения ребенка со второй группой крови (генотип АА) равна 25%.

8. Женщина со II группой крови и резус — отрицательная, причем по группе крови она гомозиготна, выходит замуж за мужчину с III группой крови и резус — положительного, гетерозиготного по обоим признакам.
Определите генотипы и фенотипы возможных детей.

P: ААrr.. *… BORr
G: ..Ar…..BR,Br,OR,Or
F: ABRr,ABrr,AORr,AOrr (с четвертой группой резус-положительные и резус-отрицательные, со второй группой резус-положительные и резус-отрицательные).

9. В судебной экспертизе определение группы крови используется для исключения отцовства. Можно ли исключить отцовство в случае, если мужчина имеет III группу крови, а ребенок и его мать II группу? Возможно ли исключение отцовства, если группа крови у мужчины I, II и IV?

Да, в первом случае, когда у мужчины III группа крови, его отцовство можно исключить (его генотип ВВ или ВО, генотип женщины АА или АО. Поэтому ребенок с генотипом АА или АО точно не от него). У этого ребенка может быть отец с группами крови I (генотип ОО), II (генотип АА или АО) или IV (генотип АВ).

10. В родильном доме в одну и ту же ночь родилось четыре младенца, обладавшие, как впоследствии было установлено, группами крови О, А, В и АВ. Группы крови четырех родительских пар были: 1) О и О; 2) АВ и О; 3) А и В; 4) В и В. Четырех младенцев можно с полной достоверностью распределить по родительским парам. Как это сделать?

Запишем генотипы родителей этих 4-х несчастных (перепутанных) младенцев: 1) ОО и ОО; 2) АВ и ОО; 3) АА или АО и ВВ или ВО; 4) ВВ или ВО и ВВ или ВО. Генотипы младенцев: 1) ОО; 2) АА или АО; 3) ВВ или ВО; 4) АВ.

Видим, что первый младенец мог родиться у любой пары (кроме пары 2) и его генотип нам пока мало, что может прояснить.

Второй младенец мог родиться и у пары 2), и у пары 3), но так как четвертый младенец мог родиться только от пары 3), то второй точно от пары 2).

Третьему младенцу из оставшихся пар родителей подходит только пара 4). Поэтому родителями первого младенца будет пара 1).
Далеко не всегда по группам крови можно установить родство. Пусть хоть сто младенцев родится в одну ночь, путать никого нельзя!

11. У моих родителей отец: 2+, мать 4+, родилась я со 2- группой крови, возможно ли такое? У меня ещё есть брат и сестра родные, у брата 4+, у сестры 2+. И я вышла замуж за человека с 3- группой крови, с какой группой крови у нас родится малыш?

Да у родителей с резус + кровью может родиться ребенок с резус — кровью, если они оба гетерозиготны по резус-фактору (то есть, их генотипы по резус-фактору Rr и Rr).

По системе АВО Ваш отец имеет генотип АО или АА, а мама однозначно АВ. Генотип Вашей группы по системе АВО и по резус-фактору ААrr или AOrr. Ваш брат имеет генотип ABRr или ABRR, сестра — AARr (или AARR, AORr, AORR). Ваш муж имеет генотип BBrr или BOrr. Ваш малыш может быть любым по группам крови (так как его генотип может быть OO, AO, BO, AB), но только резус — , то есть rr.

12. Мужчина и женщина, вступившие в брак, имеют следующие генотипы: у мужа — RrBB, у жены — rrAO. Какова вероятность рождения резус-положительного ребенка с IV группой крови?

В этой задаче нет ни одного момента из-за которого решение её могло бы вызвать затруднение. Не только родительские фенотипы указываются, но и расписаны сами генотипы.
P: ddАО x DdBB
G: dA,dO..DB,dB
F1: DdAB,DdBO,ddAB,ddBO, таким образом мы видим, что их четырех возможных генотипов потомства вероятность рождения детей DdAB (резус-положительных с IV группой крови) равна 25%.

13. Резус-положительная женщина со второй группой крови, отец которой имел резус отрицательную кровь первой группы, вышла замуж за резус-отрицательного мужчину с первой группой крови. Какова вероятность, что ребёнок унаследует оба признака отца?

Резус-положительная женщина со второй группой крови обязательно имеет аллели R-большое и А. Так как её отец был по генотипу rr, а по группе крови его генотип мог быть только 00, значит вторые аллели обоих признаков у женщины были рецессивными и её генотип был RrA0. Генотип мужчины мог быть только rr00.
P: ….RrA0….x.. rr00
G: RA,R0,rA,r0……r0
F1: RrA0,Rr00,rrA0,rr00 — как видим вероятность рождения ребенка с генотипом отца rr00 равна 25%.

14. Если у мамы первая группа крови, а у папы третья, ребёнок со второй может родиться?

Нет не может.
P: 00 x BB (или B0)
G: 0…..B (или B и 0)
F: B0 (или еще и 00). То есть могут быть дети только с 3-ей группой или с 1-ой.

15. Генотип женщины — RrBB, мужа — RrA0. Какова вероятность рождения резус-положительного ребенка с IV группой крови?

P: RrBB…x…..RrA0
G: RB,rB……RA,R0,rA,r0
F: RRAB,RRB0,RrAB,RrB0, RrAB,RrB0,rrAB,rrB0. Как мы видим в этом браке возможно рождение детей с 8-ю разными генотипами. Вероятность рождения резус-положительного ребенка с IV группой крови (то есть с генотипом RRAB или RrAB) равна 3/8 или 37,5%.

16. У мальчика 1 группа крови, у его сестры 4. Определите группы крови их родителей (Р).

Генотип мальчика с 1-й группой крови ОО, генотип его сестры с 4-й группой крови АВ. У родителей 2-я АО и 3-я ВО группы крови.

17. Родители имеют 3-ю группу крови, резус-фактор +. В потомстве есть ребенок с 1-ой группой крови, резус-фактор -. Какими еще могут быть дети в этом браке?

Сначала запишем генотипы родителей не полностью, а, исходя из их фенотипов, впишем лишь известные, аллели. (Вместо вторых аллелей ставим временно «-» радикал). Итак, имеем группу крови родителей В-, резус-фактор R-. Из условия задачи нам полностью известен генотип одного из детей OOrr. Значит оба родителя могли быть только дигетерозиготными BORr.
P: …BORr……. x…… BORr
G: BR,Br,OR,Or…..BR,Br,OR,Or, далее строим решетку Пеннета 4х4 и получим 9 B-R- : 3 B-rr: 3 OOR- : 1 OOrr. Значит в этом браке могут быть еще дети с 3-ей группой резус положительные, с 3-ей группой резус отрицательные и с 1-ой группой резус положительные.

18. У моего мужа группа крови В+ у меня А+. А у дочки О+.Возможно такое?

Конечно, возможно, если вы оба гетерозиготны по группе крови. Генотип мужа только ВО и ваш генотип обязательно АО.

19. Резус положительный мужчина со второй группой крови женился на резус положительной с третьей группой крови. Найти F1, если женщина и мужчина гетерозиготные по обеим парам признаков .

P: AORr…. *…. BORr
G: AR,Ar,OR,Or…..BR,Br,OR,Or, далее надо построить решетку Пеннета 4х4.

Вы увидите, что 16 вероятных генотипов потомства (что для людей совершенно невероятно и поэтому нет вообще ничего глупее, чем составлять и, тем более, решать такого типа задания) будут представлены такими 8-ю фенотипическими классами: 3 ABR-, 3 OOR-, 3 AOR-, 3BOR-, 1 ABrr, 1 AOrr, 1 BOrr, 1 OOrr.

То есть, если бы у этих родителей родилось 7-8 тысяч детей (а именно столько Мендель использовал для получения достоверных данных), тогда 3/16 потомства имели бы четвертую резус положительную группу крови, 3/16 потомства имели бы первую резус положительную группу крови, 3/16 потомства имели бы вторую резус положительную группу крови, 3/16 потомства имели бы третью резус положительную группу крови, 1/16 потомства имели бы четвертую резус отрицательную группу крови, 1/16 потомства имели бы вторую резус отрицательную группу крови, 1/16 потомства имели бы третью резус отрицательную группу крови, 1/16 потомства имели бы первую резус отрицательную группу крови.

20. Определите все возможные генотипы и фенотипы детей, если у мужчины 4-я группа крови и отрицательный резус-фактор, а у его матери резус-положительный, а у женщины 2-я группа крови и положительный резус-фактор, у её матери отрицательный резус-фактор

Итак, генотип мужчины ABrr (мать его очевидно была гетерозиготна по резус-фактору, то есть Rr, так как у сына один из аллелей r достался от нее. Но это совершенно ненужная информация для решения этой задачи). Генотип женщины АА(или АО)Rr (хотя она и положительная по резус-фактору, но гетерозигота, так как у ее матери кровь была резус-отрицательной rr).
1. P: ABrr * AARr
G: Ar, Br….AR,Ar
F: AARr, AArr, ABRr, ABrr (вторая положительная, вторая отрицательная, четвертая положительная, четвертая отрицательная)
2. P: ABrr * AORr
G: Ar,Br…AR,Ar,OR,Or
F: AARr,AArr,AORr,AOrr, ABRr,ABrr,BORr,BOrr (вторая положительная, вторая отрицательная, четвертая положительная. четвертая отрицательная, третья положительная, третья отрицательная).

21. Резус-положительная женщина с кровью II группы, отец которой имеет резус-отрицательную кровь I группы, вышла замуж за резус-отрицательного мужчину с I группой крови. Какова вероятность того, что ребенок унаследует оба признака отца? Какие группы крови можно будет переливать этим детям?

Обозначим: R — резус положительная кровь, r — резус отрицательная. I группа ОО, II группа АО или АА.
Генотип резус-положительной женщины со второй группой крови был R-А-. Так как ее отец был с генотипом rrОО, то генотип этой женщины был дигетерозиготным RrAO.
P: RrAO…. *…. rrOO
G: RA,RO,rA,ro…..rO
F: RrAO, rrAO, RrOO, rrOO. Вероятность рождения ребенка с генотипом rrOO как у отца равна 25%. Их детям RrOO и rrOO можно переливать только I группу крови, а детям RrAO и rrAO — I или II группы крови.

22. В родильном доме возникло подозрение, что перепутали детей. Денис со II группой крови попал к родителям с IV и III группами крови, а Витя с III группой крови — к родителям со II и III группами крови. Произошла ли подмена детей, какова ее вероятность?

От родителей с IV и III группами крови, то есть с генотипами АВ и ВВ(ВО) дети могут иметь следующие группы крови: АВ, ВВ, АО, ВО. А у родителей с группами крови II и III, то есть с генотипами АА(АО) и ВВ(ВО) дети могут иметь такие группы крови: АВ,АО,ВО,ОО. Поскольку у Дениса II группа крови, то его генотип может быть АА или АО и его родителями могла быть любая пара с равной вероятностью. У Вити III группа крови, а значит его генотип ВВ или ВО и его родителями тоже могла быть любая пара. Таким образом, с вероятностью 50% можно утверждать, что подмены не было или подмена была.

23. Резус-отрицательная женщина (фенотип rh-) (оба ее родителя имели положительный резус-фактор). вступила в брак с резус-положительным мужчиной (фенотип Rh+). Дети с каким резус-фактором могут появиться от этого брака? Определите генотипы мужа, жены, ее родителей и возможных детей.

Так как генотип резус-отрицательной женщины был rr, то генотипы ее резус-положительных родителей могли быть только гетерозиготными Rr. Генотип ее резус-положительного мужа мог быть как RR, так и Rr, поэтому для нахождения генотипов их потомства надо рассмотреть оба возможных варианта:
а) P: rr * RR
G:…..r….R
F1: Rr — все дети резус-положительные.
б) P: rr * Rr
G:…..r…R,r
F1 Rr, rr — 50% детей резус-положительные, 50% — резус-отрицательные.

24. У братьев IV (AB) группа крови. Каковы группы крови возможны у их родителей?

Генотипы родителей по группам крови могли быть: АВ и ВО, АО и АВ и даже АО и ВО. Такое сочетание генотипов родителей ведь тоже позволяет появиться у них потомкам с генотипами АВ.

Есть также и другие вещества группы крови в эритроцитах,

которые контролируются различными генами. Они наследуются независимо от генов А, В, и 0 или резус-фактора. Например, ген,

контролирующий так называемые М и N группы крови.

Один аллель этого гена приводит к формированию М группы крови, другой — к N. Ни один из них не является доминантным по отношению к другому. Они по отношению друг к другу (как и аллели А и В по системе АВО).

Если имеется два аллеля гена М, то у человека группа крови называется М. Если имеется два аллеля гена N, то у человека группа крови называется N. Если генотип человека имеет и аллель М, и аллель N, то у этого человека MN группа крови (группы крови М и N не существенны при переливании крови).

Группы крови М и N не имеют никакой связи с группами крови А, В, и 0. Человек может иметь группу крови М, N или MN, независимо от того, имеет ли он также группу крови А, В, 0 или АВ.

25. Перед судебно-медицинской экспертизой поставлена задача выяснить, является ли мальчик, имеющийся в семье супругов Р, родным или приемным. Исследование крови мужа, жены и ребенка показало: жена — Rh-, АВ (IV) группа крови с антигеном М, муж — Rh-,0(I) группа крови с антигеном N, ребенок — Rh+, 0(I) группа крови с антигеном М. Какое заключение должен дать эксперт и на чем оно основано?

Ребенок в данной семье является приемным. Это ясно по группам крови родителей по системе АВО, по системе MN и по их резусу.

От групп крови с генотипами АВ и ОО могут быть дети только со второй АО или третьей ВО группами крови.

От родительских групп крови M и N ребенок может быть только гетерозиготным MN.

От резус-отрицательных родителей с генотипами rr x rr могут быть дети только резус-отрицательными rr.

26. Перед судебно-медицинским экспертом поставлена задача выяснить, является ли мальчик, живущий в семье супругов Р, родным или приемным сыном этих супругов. Исследование крови всех трех членов семьи дало следующие результаты. У матери группы крови Rh+, О и М; у отца — Rh-, АВ и N; у сына — Rh+, А и М. Какое заключение должен дать эксперт и как оно обосновывается?

Положительный резус-фактор мальчика не отрицает того, что он может быть сыном данных родителей (резусный белок он мог унаследовать от резус-положительной матери).

Наличие у него второй группы крови с генотипом АО тоже не противоречит его родству с родителями (ОО — у матери и АВ — у отца).

А вот по системе группы крови М, N, MN, мальчик не может быть сыном указанных родителей. У матери с генотипом ММ и отца с генотипом NN, ребенок должен был бы быть только с генотипом МN, а у этого мальчика генотип ММ. Вывод: мальчик не является родным сыном данных родителей.

27. Женщина с группами крови А и NN подает в суд на мужчину, как на виновника рождения ребенка с первой группой крови, NN. Мужчина имеет третью группу крови (В), ММ. Может ли этот мужчина быть отцом ребенка?

Исходя из условия задания, понятно, что претензии женщины к данному мужчине совершенно не правомочны. Да, по системе групп крови АВО, если они оба по своим группах крови гетерозиготны АО и ВО, то у них мог бы быть ребенок с 1 группой крови с генотипом ОО. Но по системе группы крови M, N, MN у неё от мужчины с генотипом ММ мог бы быть ребенок только с генотипом MN.

28. Дедушка мальчика со стороны матери имеет группу крови АВ, а остальные бабушки и дедушка имеют группу крови 0. Какова вероятность для данного мальчика иметь группу крови А, В, АВ и 0?

Мама мальчика может иметь группы крови с генотипами АО или ВО, а папа только ОО. Поэтому генотип мальчика АО и ОО или ВО и ОО, то есть вероятность иметь группу крови А = 25%, В = 25%, О — 50%, АВ — 0%.

*****************************************************************************

У кого будут вопросы по статье к репетитору биологии по Скайпу, обращайтесь в комментарии.

ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

В последующем тексте анти-А- и анти-В-антитела будут обозначаться как анти-А и анти-В.

Таблица 18.4. Результаты определения группы крови АВО
Результаты исследования						Групповая принадлежность исследуемой крови
эритроцитов с реагентом			сыворотки (плазмы) со стандартными эритроцитами
анти-АВ	анти-А	анти-В	0(I)	А(II)	В (III)
-	-	-	-	+	+	0(I)
+	+	-	-	-	+	А(II)
+	-	+	-	+	-	В(III)
+	+	+	-	-	-	АВ(IV)
Обозначения : + - наличие агглютинации, - - отсутствие агглютинации

Определение групповой принадлежности крови по системе АВО

Ход определения [показать] .
Определение группы крови производят при хорошем освещении и температуре от + 15 до + 25°С на планшетах. На левой стороне планшета надписывают 0(1), в середине - А(II), на правой стороне - В(III). В середине верхнего края планшета отмечают фамилию донора или номер исследуемой крови. Используют активные стандартные сыворотки трех групп (О, А, В) с титром не ниже 1:32, двух серий. Сыворотки располагают в специальных штативах в два ряда. Каждой сыворотке соответствует маркированная пипетка. Для дополнительного контроля используют сыворотку группы АВ(IV).
На планшет наносят по одной - две капли стандартных сывороток в два ряда: сыворотку группы 0(1) - слева, сыворотку группы А(II) - в середину, сыворотку группы В(III) - справа.
Капли крови из пальца или пробирки наносят пипеткой или стеклянной палочкой около каждой капли сыворотки и смешивают палочкой. Количество крови должно быть в 8-10 раз меньше, чем сыворотки. После смешивания тарелку или планшет осторожно покачивают в руках, что способствует более быстрой и четкой агглютинации эритроцитов. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин, к каплям сыворотки с эритроцитами, где наступила агглютинация, добавляют по одной капле 0,9% раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение до истечения 5 мин. Через 5 мин читают реакцию в проходящем свете.
Если агглютинация нечеткая, к смеси сыворотки и крови дополнительно добавляют по одной капле 0,9% раствора хлорида натрия, после чего дают заключение о групповой принадлежности (табл. 18.4).
Результаты реакции [показать] .
1. Отсутствие агглютинации во всех трех каплях указывает на то, что в исследуемой крови нет агглютиногена, то есть кровь относится к группе 0(I).
2. Наступление агглютинации в каплях с сыворотками 0(I) и В(III) указывает на то, что в крови имеется аггглютиноген А, то есть кровь относится к группе А(II).
3. Наличие агглютинации в каплях с сыворотками группы 0(I) и А(II) указывает на то, что в исследуемой крови имеется агглютиноген В, то есть кровь группы В(III).
4. Агглютинация во всех трех каплях указывает на наличие в исследуемой крови агглютиногенов А и В, то есть кровь относится к группе АВ(IV). Однако в этом случае, учитывая, что агглютинация со всеми сыворотками возможна за счет неспецифической реакции, необходимо нанести на планшет или тарелку две-три капли стандартной сыворотки группы АВ(IV) и добавить к ним 1 каплю исследуемой крови. Сыворотку и кровь перемешивают и результат реакции наблюдают в течение 5 мин.
  Если агглютинация не наступила, то исследуемую кровь относят к группе АВ(IV). Если же агглютинация появляется с сывороткой группы АВ(IV), значит, реакция неспецифическая. При слабой агглютинации и во всех сомнительных случаях кровь заново проверяют со стандартными сыворотками других серий.

Определение группы крови АВО двойной реакцией
(по стандартным сывороткам и стандартным эритроцитам)

Ход определения [показать] .
На планшет наносят по две капли (0,1 мл) стандартных сывороток групп 0(I), А(II), В(III) двух серий. Соответственно каждой группе сывороток располагают по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп 0(I), А(II), В(III). В стандартные сыворотки добавляют по одной капле исследуемой крови, а в стандартные эритроциты - по две капли исследуемой сыворотки. Количество крови должно быть в 8-10 раз меньше, чем сыворотки. Капли перемешивают стеклянной палочкой и, покачивая планшет в руках в течение 5 мин, следят за наступлением агглютинации. Если агглютинация нечеткая, к смеси сыворотки и крови дополнительно добавляют по одной капле 0,9% раствора хлорида натрия (0,1 мл), после чего делают заключение о групповой принадлежности (табл. 18.4).
Оценка результатов определения группы крови системы АВО [показать] .
1. Наличие агглютинации со стандартными эритроцитами А и В и отсутствие агглютинации в трех стандартных сыворотках двух серий указывает на то, что в исследуемой сыворотке присутствуют оба агглютинина - альфа и бета, а в исследуемых эритроцитах нет агглютиногенов, то есть кровь относится к группе 0(I).
2. Наличие агглютинации со стандартными сыворотками групп 0(I), В(III) и со стандартными эритроцитами группы В(III) указывает на то, что в исследуемых эритроцитах имеется агглютиноген А, а в исследуемой сыворотке - агглютинин бета. Следовательно, кровь относится к группе А(II).
3. Наличие агглютинации со стандартными сыворотками групп 0(I), А(II) и со стандартными эритроцитами группы А(II) указывает на то, что в исследуемых эритроцитах имеется агглютиноген В, а в исследуемой сыворотке - агглютинин альфа. Следовательно кровь относится к группе В(III).
4. Наличие агглютинации со всеми стандартными сыворотками и отсутствие агглютинации со всеми стандартными эритроцитами указывает на то, что в исследуемых эритроцитах имеются оба агглютинина, то есть кровь относится к группе АВ(IV).

Определение групповой принадлежности крови
с использованием цоликлонов анти-А и анти-В

Ход определения [показать] .
На планшет (пластинку) наносят по одной большой капле цоликлонов анти-А и анти-В (0,1 мл) под соответствующими надписями: "Анти-А" или "Анти-В". Рядом помещают по одной маленькой капле исследуемой крови (соотношение кровыреагент - 1:10), затем реагент и кровь смешивают и наблюдают за ходом реакции при легком покачивании планшета или пластинки.
Агглютинация с цоликлонами анти-А и анти-В обычно наступает в первые 5-10 с. Наблюдение следует вести 2,5 мин, ввиду возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.
Оценка результатов реакции агглютинации с цоликлонами анти-А и анти-В представлена в табл. 18.4, в которую также включены результаты определения агглютининов в сыворотке доноров с помощью стандартных эритроцитов.

ОШИБКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ

Ошибки при определении групп крови могут зависеть от трех причин:

технических;
неполноценности стандартных сывороток и стандартных эритроцитов;
биологических особенностей исследуемой крови.

К ошибкам по техническим причинам относятся:

а) неправильное расположение сывороток на планшете;
б) неправильные количественные соотношения сывороток и эритроцитов;
в) применение недостаточно чистых планшетов и других предметов, соприкасающихся с кровью. Для каждой сыворотки должна быть отдельная пипетка; для промывания пипеток следует применять только 0,9% раствор хлорида натрия;
г) неправильная запись исследуемой крови;
д) несоблюдение положенного для реакции агглютинации времени; при поспешности, когда реакцию учитывают до истечения 5 мин, агглютинация может не наступить, если в исследуемой крови имеются слабые агглютиногены; при передержанной более 5 мин реакции может произойти подсыхание капель с краев, симулирующее агглютинацию, что также поведет к ошибочному заключению;
е) отсутствие агглютинации из-за высокой (выше 25°С) температуры окружающего воздуха. Во избежание этой ошибки целесообразно использовать специально приготовленные сыворотки для работы в условиях жаркого климата; производить определение групп крови на тарелке или пластмассовом подносе, внешняя поверхность дна которых опущена в холодную воду.
ж) неправильное центрифугирование: недостаточное может привести к ложноотрицательному результату, а избыточное - к ложноположительному.

Ошибки, зависящие от применения неполноценных стандартных сывороток и стандартных эритроцитов:

а) слабые стандартные сыворотки с титром ниже чем 1:32 или с истекшим сроком годности могут вызывать позднюю и слабую агглютинацию;
б) применение негодных стандартных сывороток или эритроцитов, которые были приготовлены нестерильно и недостаточно законсервированы, ведет к возникновению неспецифической "бактериальной" агглютинации.

Ошибки, зависящие от биологических особенностей исследуемой крови:

Ошибки, зависящие от биологических особенностей исследуемых эритроцитов:

а) поздняя и слабая агглютинация объясняется "слабыми" формами антигенов, эритроцитов, чаще - наличием в группах А и АВ слабого агглютиногена А 2 . При этом, в случае определения группы крови без исследования сыворотки на наличие агглютининов (простая реакция) могут наблюдаться ошибки, вследствие которых кровь группы А 2 В определяют как группу В(III), а кровь А 2 - как группу 0(I). Поэтому, во избежание ошибок, определение группы крови как доноров, так и реципиентов необходимо проводить с использованием стандартных эритроцитов (двойная или перекрестная реакция). Для идентификации агглютиногена А 2 рекомендуется повторить исследование с другими видами (сериями) реагентов, используя другую лабораторную посуду, с увеличением времени регистрации реакции.
Специфическими реагентами уточнения группы крови при наличии слабых вариантов антигена А (А 1 , А 2 , А 3) методом прямой реакции агглютинации являются цоликлон анти-А сл и реагент анти-А).
б) "панагглютинация" или "аутоагглютинация", то есть способность крови давать одинаковую неспецифическую агглютинацию со всеми сыворотками и даже со своей собственной. Интенсивность подобной реакции после 5 мин ослабевает, в то время как истинная агглютинация усиливается. Наиболее часто встречается у гематологических, онкологических больных, обожженных и др. Для контроля рекомендуется оценить, происходит ли агглютинация тестируемых эритроцитов в стандартной сыворотке группы АВ (IV) и физиологическом растворе.
Группа крови при "панагглютинации" может быть определена после трехкратного отмывания эритроцитов. Для устранения неспецифической агглютинации планшет помещают в термостат при температуре +37°С на 5 мин, после чего неспецифическая агглютинация исчезает, а истинная остается. Целесообразно повторить определение с использованием моноклональных антител, постановки пробы Кумбса.
В том случае, когда отмывание эритроцитов не дает желаемого результата, необходимо произвести повторное взятие образца крови в предварительно согретую пробирку, поместить пробу в термоконтейнер для поддержания температуры +37°С и доставить в лабораторию на исследование. Определение группы крови необходимо производить при температуре +37°С, для чего используют предварительно подогретые реактивы, физиологический раствор и планшет.
в) эритроциты тестируемой крови складываются в "монетные столбики", которые при макроскопии можно принять за агглютинаты. Прибавление 1-2 капель изотонического раствора хлорида натрия с последующим мягким покачиванием планшета, как правило, уничтожает "монетные столбики".
г) смешанная или неполная агглютинация: часть эритроцитов агглютинирует, а часть остается свободной. Наблюдается у пациентов групп А(II), В(III) и АВ(IV) после трансплантации костного мозга или в течение первых трех месяцев после переливания крови группы 0(I). Разнородность эритроцитов периферической крови четко верифицируется в гелевом тесте DiaMed.

Ошибки, зависящие от биологических особенностей исследуемой сыворотки:

а) выявление антител другой специфичности при рутинном тестировании является результатом предшествующей сенсибилизации. Целесообразно определить специфичность антител и подобрать типированные эритроциты без антигена, к которому выявлена иммунизация. Иммунизированному реципиенту обязателен индивидуальный подбор совместимой донорской крови;
б) при выявлении образования "монетных столбиков" стандартных эритроцитов в присутствии тестируемой сыворотки аномальный результат целесообразно подвердить, используя стандартные эритроциты группы 0(I). Для дифференцировки "монетных столбиков" и истинных агглютинатов добавляют 1-2 капли изотонического раствора хлорида натрия и покачивают планшет, при этом "монетные столбики" разрушаются;
в) отсутствие анти-А- или анти-В-антител. Возможно у новорожденных и пациентов с угнетением гуморального иммунитета;

всего страниц:

ЛИТЕРАТУРА [показать] .

Иммунологический подбор донора и реципиента при переливаниях крови, ее компонентов и трансплантациях костного мозга / Сост. Шабалин В. Н., Серова Л. Д., Бушмарина Т.Д. и др.- Ленинград, 1979.- 29 с.
Калеко С. П., Серебряная Н. Б., Игнатович Г. П. и др. Аллосенсибилизация при гемокомпонентной терапии и оптимизация подбора гистосовместимых пар "донор-реципиент" в военных лечебных учреждениях/ Методич. рекомендации.- С.-Петербург, 1994.- 16 с.
Практическая трансфузиология / Ред. Козинец Г. И., Бирюкова Л. С., Горбунова Н.А. и др.- Москва: Триада-Т, 1996.- 435 с.
Руководство по военной трансфузиологии / Ред. Э. А. Нечаев. - Москва, 1991. - 280 с.
Руководство по трансфузионной медицине / Под ред. Е. П. Сведенцова. - Киров, 1999.- 716с.
Румянцев А. Г., Аграненко В. А. Клиническая трансфузиология.- М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1997.- 575 с.
Шевченко Ю.Л., Жибурт Е.Б., Безопасное переливание крови: Руководство для врачей.- СПб.: Питер, 2000.- 320 с.
Шевченко Ю.Л., Жибурт Е.Б., Серебряная Н.Б. Иммунологическая и инфекционная безопасность гемокомпонентной терапии.- СПб.: Наука, 1998.- 232 с.
Шиффман Ф.Дж. Патофизиология крови / Пер. с англ.- М.- СПб.: Издательство БИНОМ - Невский диалект, 2000.- 448 с.
Blood transfusion in Clinical Medicine / Ed. P.L.Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988.- 1233 p.

Источник : Медицинская лабораторная диагностика, программы и алгоритмы. Под ред. проф. Карпищенко А.И., СПб, Интермедика, 2001