Главная · Простудные заболевания · Вопросы. Консультации: венерология

Вопросы. Консультации: венерология

При первичном сифилисе исследуется на бледную трепонему отделяемое твердого шанкра или пунктат лимфатических узлов. При вторичном сифилисе материал берется с поверхности эрозированных папул на коже, слизистых, с трещин и др. Перед взятием материала с целью очищения от различных загрязнений поверхность очагов (эрозии, язвы, трещины) необходимо тщательно протереть стерильным ватно-марлевым тампоном, который смачивается изотоническим раствором хлорида натрия или назначить примочки с этим же раствором. Очищенную поверхность осушивают сухим тампоном и платиновой петлей или лопаточкой слегка раздражают периферические участки, одновременно слегка сдавливая пальцами в резиновой перчатке основание элемента до появления тканевой жидкости (серума), из которой готовят препарат для исследования. Получение тканевой жидкости имеет важное значение для диагностики сифилиса, так как бледные трепонемы находятся в просветах лимфатических капилляров, в тканевых щелях вокруг лимфатических и кровеносных сосудов.

Пункция регионарных лимфатических узлов

Кожу над лимфатическими узлами обрабатывают 96% спиртом и 3-5% спиртовым раствором йода. Затем 1 и 2 пальцами левой кисти фиксируют лимфатический узел. Правой рукой берут стерильный шприц с несколькими каплями изотонического раствора хлорида натрия, который вкалывается параллельно продольной оси лимфатического узла. Игла проталкивается в разных направлениях до противоположной стенки капсулы узла и содержимое шприца медленно вводится. Пальцами левой кисти лимфатический узел слегка массируется. При медленном извлечении иглы одновременно выдвигают поршень шприца, аспирируя содержимое лимфатического узла. Материал наносится на предметное стекло (при малом количестве материала добавляется капля изотонического раствора хлорида натрия), покрывается покровным стеклом. Исследование нативного препарата проводится в темном поле зрения при помощи светооптического микроскопа с темнопольным конденсором (объектив 40, 7х, 10х или 15х). Бледные трепонемы могут обнаруживаться также в окрашенных препаратах. При окраске по Романовскому-Гимзе бледные трепонемы окрашиваются в розовый цвет, по Фонтану и Морозову в коричневый (черный), по методу Бурри неокрашенные трепонемы выявляются на темном фоне.

Серологическая диагностика

Важное значение в диагностике сифилиса, оценке эффективности лечения, установлении критерия излеченности, выявления скрытых, резистентных форм придается стандартным (классическим) и специфическим серологическим реакциям. К стандартным или классическим серологическим реакциям (КСР) относятся:
  • Реакция Вассермана (РВ),
  • осадочные реакции Кана и Закса-Витебского (цитохолевая),
  • реакция на стекле (экспресс-метод),
к специфическим:
  • реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ),
  • реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Реакция Вассермана (РВ)

- разработана А.Вассерманом (A.Wasserman) совместно с А.Нейссером (A.Neisser) и Ц.Бруком (C.Bruck) в 1906 году. Реакции Вассермана основана на феномене связывания комплемента (реакция Борде-Жангу) и позволяет определять противолипидные антитела (реагины). Согласно современным представлениям, в реакции Вассермана определяются антитела к липидам макроорганизма, а не бледной трепонемы и реакция выявляет аутоиммунный процесс, который вызывается денатурированием бледными трепонемами тканей макроорганизма с образованием липопротеидного комплекса (конъюгата), в котором липиды (гаптены) являются детерминантой.

Обычно РВ ставится с двумя или тремя антигенами. Наиболее часто применяется отличающийся высокой чувствительностью кардиолипиновый антиген (экстракт из сердца быка, обогащенный холестерином и лецитином) и трепонемный антиген (обработанная ультразвуком взвесь анатогенных культуральных бледных трепонем). Совместно с реагинами сыворотки крови больного эти антигены образуют иммунный комплекс, способный адсорбировать и связывать комплемент. Для визуального определения образованного комплекса (реагины + антиген + комплемент) в качестве индикатора применяется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент связан в 1 фазе реакции (реагины + антиген + комплемент), гемолиз не наступает - эритроциты выпадают в легко заметный осадок (РВ положительная). Если в 1 фазе комплемент не связан вследствие отсутствия в испытуемой сыворотке реагинов, он будет использован гемолитической системой и произойдет гемолиз (РВ отрицательная). Степень выраженности гемолиза при постановке РВ оценивается плюсами: полное отсутствие гемолиза ++++ или 4+ (РВ резкоположительная); едва начавшийся гемолиз +++ или 3+ (РВ положительная); значительный гемолиз ++ или 2+ (РВ слабоположительная); непонятная картина гемолиза ± (РВ сомнительная); полный гемолиз - (реакция Вассермана отрицательная).

Помимо качественной оценки РВ имеется количественная постановка с различными разведениями сыворотки (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320). Титр реагинов определяется максимальным разведением, еще дающим резко положительный (4+) результат. Количественная постановка РВ имеет значение в диагностике некоторых клинических форм сифилитической инфекции, а также при проведении контроля за эффективностью лечения. В настоящее время реакция Вассермана ставится с двумя антигенами (кардиолипиновый и трепонемный озвученный штамм Рейтера). Как правило, РВ становится положительной на 5-6 неделе после заражения у 25-60% больных, на 7-8 неделе - у 75-96%, на 9-19 неделе - у 100%, хотя в последние годы иногда раньше или позже. При этом, титр реагинов постепенно нарастает и достигает максимальной величины (1:160-1:320 и выше) в случае появления генерализованных высыпаний (сифилис вторичный свежий). При позитивации РВ выставляется диагноз первичного серопозитивного сифилиса.
При вторичном свежем и вторичном рецидивном сифилисе РВ положительная у 100% больных, но у истощенных больных с ослабленным иммунитетом может наблюдаться отрицательный результат. Впоследствии титр реагинов постепенно понижается и при вторичном рецидивном сифилисе обычно не превышает 1:80-1:120.
При третичном сифилисе РВ положительная у 65-70% больных и обычно наблюдается низкий титр реагинов (1:20-1:40). При поздних формах сифилиса (сифилис внутренних органов, нервной системы) положительная РВ наблюдается в 50-80% случаев. Титр реагинов колеблется от 1:5 до 1:320.
При скрытом сифилисе положительная РВ отмечается у 100% больных. Титр реагинов от 1:80 до 1:640, а при позднем скрытом сифилисе от 1:10 до 1:20. Быстрое снижение титра реагинов (вплоть до полной негативации) во время лечения свидетельствует об эффективности лечения.

Недостатки реакции Вассермана - недостаточная чувствительность (в начальной стадии первичного сифилиса отрицательная). Она негативная также у 1/3 больных, если они в прошлом лечились антибиотиками, у пациентов третичным активным сифилисом с поражениями кожи и слизистых, костно-суставного аппарата, внутренних органов, центральной нервной системы, при позднем врожденном сифилисе.
Недостаточная специфичность - реакция Вассермана может быть положительная у лиц, которые ранее не болели и не болеют сифилисом. В частности ложноположительные (неспецифические) результаты РВ отмечаются у больных, которые страдают системной красной волчанкой, лепрой, малярией, злокачественными новообразованиями, поражениями печени, обширными инфарктами миокарда и другими заболеваниями, а иногда у совершенно здоровых людей.
Кратковременная ложноположительная реакция Вассермана выявляется у некоторых женщин перед родами или после них, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, после наркоза, приема алкоголя. Как правило, ложноположительная РВ выражена слабо, чаще с низким титром реагинов (1:5-1:20), положительная (3+) или слабо положительная (2+). При массовых серологических обследованиях частота ложноположительных результатов составляет 0,1-0,15%. Для преодоления недостаточной чувствительности, пользуются постановкой на холоде (реакция Колляра) и одновременно она ставится с другими серологическими реакциями.

Осадочные реакции Кана и Закса-Витебского

Реакция Вассермана применяется в комплексе с двумя осадочными реакциями (Кана и Закса-Витебского ), при постановке которых готовятся более концентрированные антигены. Экспресс метод (микрореакция на стекле) - относится к липидным реакциям и основан на реакции преципитации. Ставится со специфическим кардиолипиновым антигеном, 1 каплю которого смешивают с 2-3 каплями исследуемой сыворотки крови в лунках специальной стеклянной пластины.
Преимущество - быстрота получения ответа (через 30-40 мин). Результаты оцениваются по количеству выпавшего осадка и величины хлопьев. Выраженность определяют как КСР - 4+, 3+, 2+ и отрицательная. Следует отметить, что ложноположительные результаты наблюдаются чаще, чем при РВ. Как правило, экспресс-метод применяется при массовых обследованиях на сифилис, при обследовании в клинико-диагностических лабораториях, соматических отделениях и больницах. На основании результатов экспресс-метода диагноз сифилиса выставлять запрещается, исключается его применение у беременных, доноров, а также для контроля после лечения.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) - предложена в 1949 году Р.Нельсоном (R.W.Nelson) и М.Мейером (M.Mayer). Является наиболее специфичным диагностическим тестом на сифилис. Однако сложность и дороговизна постановки ограничивает ее применение. В сыворотке крови больных производится определение видеоспецифичных антител (иммобилизинов), которые приводят к неподвижности бледных трепонем в присутствии комплемента. Антигеном являются живые патогенные бледные трепонемы, выделяемые от зараженных сифилисом кроликов. С помощью микроскопа проводится посчет утративших подвижность (иммобилизованных) бледных трепонем и оцениваются результаты РИБТ: иммобилизация бледных трепонем от 51 до 100% - положительная; от 31 до 50% - слабо положительная; от 21 до 30% - сомнительная; от 0 до 20% - отрицательная.
РИБТ имеет значение при дифференциальной диагностике для отграничения ложноположительных серологических реакций от реакций, обусловленных сифилисом. Поздно становится положительной чем РВ, РИФ и поэтому для диагностики заразных форм сифилиса ее не применяют , хотя во вторичном периоде сифилиса она положительная у 85-100% больных.
В третичном периоде сифилиса с поражением внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы РИБТ положительная в 98-100% случаев (РВ часто отрицательная ).
Необходимо помнить, что РИБТ может оказаться ложноположительной в случае наличия в исследуемой сыворотке трепонемоцидных препаратов (пенициллин, тетрациклин, макролиты и др.), которые вызывают неспецифическую иммобилизацию бледных трепонем. С этой целью кровь на РИБТ исследуется не ранее 2 недель после окончания приема антибиотиков и других лекарственных средств.
РИБТ как и РИФ в процессе лечения медленно негативируются, поэтому она не применяется в качестве контроля в процессе лечения.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) - разработана в 1954 году A.Coons и впервые применена для диагностики сифилитической инфекции Deacon, Falcone, Harris в 1957 году. РИФ основана на непрямом методе определения флюоресцирующих антител. Антигеном для постановки являются фиксированные на предметных стеклах тканевые патогенные бледные трепонемы, на которые наносят исследуемую сыворотку. Если в исследуемой сыворотке имеются противотрепонемные антитела, относящиеся к IgM и IgG, они прочно связываются с антигеном - трепонемами, что выявляется в люминесцентном микроскопе с помощью антивидовой ("противочеловеческой") флюоресцирующей сыворотки.
Результаты РИФ учитываются по интенсивности свечения бледных трепонем в препарате (желто-зеленое свечение). При отсутствии противотрепонемных антител в сыворотке, бледные трепонемы не определяются. При наличии антител выявляется свечение бледных трепонем, степень которого выражается в плюсах: 0 и 1+ - отрицательная реакция; от 2+ до 4+ - положительная.
РИФ относится к групповым трепонемным реакциям и ставится в разведении исследуемой сыворотки в 10 и 200 раз (РИФ-10 и РИФ-200). РИФ-10 считается более чувствительной, однако часто выпадают неспецифические положительные результаты, чем при постановке РИФ-200 (отличается более высокой специфичностью). Как правило, РИФ становится положительной раньше, чем РВ - положительная при первичном серонегативном сифилисе у 80% больных, у 100% во вторичном периоде сифилиса, всегда положительная при скрытом сифилисе и в 95-100% случаев при поздних формах и врожденном сифилисе.
Специфичность РИФ повышается после предварительной обработки исследуемой сыворотки сорбентом-ультраозвученным трепонемным антигеном, который связывает групповые антитела (РИФ - абс).
Показания к постановке РИБТ и РИФ - диагностика скрытого сифилиса для подтверждения специфичности комплекса липидных реакций в случае предположения сифилитической инфекции на основании положительной РВ. Положительные РИБТ и РИФ являются доказательством латентного сифилиса. При ложноположительной РВ при различных болезнях (системная красная волчанка, злокачественные новообразования и др.) и если повторные результаты РИБТ и РИФ отрицательные, это свидетельствует о неспецифическом характере РВ. Подозрение на поздние сифилитические поражения внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы при наличии у больных отрицательной РВ. Подозрение на первичный серонегативный сифилис, когда у пациентов при многократных исследованиях отделяемого с поверхности эрозии (язвы), при пунктате из увеличенных регионарных лимфатических узлов бледная трепонема не обнаруживается - в этом случае ставится только РИФ - 10.
При обследовании лиц с отрицательной РВ , которые имели длительные половые и бытовые контакты с больными сифилисом, учитывая вероятную возможность лечения их в недавнем прошлом противосифилитическими препаратами, вызвавшими негативацию РВ. Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA - enzymelinked immunosorbent assay) - метод разработан E.Engvall и соавт., S.Avrames (1971). Сущность состоит в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя с антителом исследуемой сыворотки крови и выявлении специфического комплекса антиген-антитело при помощи меченной ферментом антивидовой иммунной сыворотки крови. Это позволяет оценивать результаты ИФА визуально по степени изменения окраски субстрата под действием фермента, входящего в состав конъюгата. Недостоверные результаты ИФА могут возникать в результате недостаточного разведения инградиентов, нарушения температурного и временного режимов, несоответствии рН растворов, загрязнении лабораторной посуды, неправильной технике промывки носителя.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Предложена в качестве диагностического теста на сифилис T.Rathlev (1965,1967), T.Tomizawa (1966). Макромодификация реакции называется ТРНА, микромодификация - МНА-ТР, автоматизированный вариант - AMNA-TR, реакция с макрокапсулами из полимочевины вместо эритроцитов - МСА-ТР. Чувствительность и специфичность РПГА аналогичны РИБТ, РИФ, но РПГА имеет меньшую чувствительность при ранних формах сифилиса по сравнению с РИФ-абс и большую при поздних, при врожденном сифилисе. РПГА ставится в качественном и количественном вариантах.

Техника взятия крови для серологических реакций

Для исследования на РВ, РИФ, РИБТ кровь берут из локтевой вены натощак или не раньше 4 час после приема пищи стерильным шприцом или одной иглой (самотеком). В месте взятия кожу предварительно обрабатывают 70% спиртом. Шприц и игла должны быть промыты изотоническим раствором хлорида натрия. В чистую сухую холодную пробирку вливают 5-7 мл исследуемой крови. На пробирку клеится чистая бумага с фамилией, инициалами пациента, номером истории болезни или амбулаторной карты, датой взятия крови. После взятия крови пробирка помещается в холодильник с температурным режимом +4°+8°С до следующего дня. На следующий день сыворотка сливается для исследования. В случае не использования крови на следующий день, сыворотку необходимо слить со сгустка и хранить в холодильнике не более 1 недели. Для исследования на РИБТ пробирка должна быть специально подготовлена и стерильна. В случае нарушения правил забора крови на исследование, несоблюдение условий может произойти искажение результатов.
Не рекомендуется производить забор крови для исследования после приема пищи, алкоголя, различных медикаментозных препаратов, после введения различных вакцин, во время менструального цикла у женщин.
Для исследования на экспресс-метод кровь берегся из кончика пальца, как это делается при ее взятии на СОЭ, но берут кровь на 1 капилляр больше. Экспресс-метод можно также ставить с сывороткой крови, полученной при помощи венопункции. Если возникает необходимость исследования крови в отдаленных лабораториях, вместо крови можно пересылать сухую сыворотку (метод сухой капли). Для этого на следующий день после взятия крови, сыворотку отделяют от сгустка и набирают в стерильный шприц в количестве 1 мл. Затем сыворотку выливают в виде 2 отдельных кружков на полоску плотной писчей бумаги (вощаная бумага или целлофан) размером 6x8 см. На свободном крае бумаги пишется фамилия, инициалы обследуемого и дата забора крови. Бумагу с сывороткой защищают от прямых солнечных лучей и оставляют при комнатной температуре до следующего дня. Сыворотка засыхает в виде небольших кружочков блестящей желтоватой стекловидной пленки. После этого, полоски бумаги с высушенной сывороткой свертывают как аптечный порошок и отсылают в лабораторию, указывая диагноз и с какой целью исследуется.

Серологическая резистентность

У части (2% и более) больных сифилисом, несмотря на проведенную полноценную противосифилитическую терапию, наблюдается замедление (отсутствие) негативации серологических реакций после окончания лечения до 12 мес и более. Возникает так называемая серологическая резистентность, которая в последние годы стала часто наблюдаться. Различают формы серологической резистентности:
  • Истинная (абсолютная, безусловная) - необходимо провести дополнительное противосифилитическое лечение, комбинируя с неспецифической терапией для повышения иммунных сил организма.
  • Относительная - после полноценного лечения бледные трепонемы образуют цист- или L-формы, которые находятся в организме в маловирулентном состоянии и вследствие этого дополнительное лечение не изменяет показатели серологических реакций, особенно РИФ и РИБТ.
В то же время в цист-формах происходят незначительные обменные процессы, а оболочки цист-форм являются чужеродным белком (антигеном). Для своей защиты организм вырабатывает специфические антнтела, которые положительны или резко положительны при постановке серологических реакций, отсутствии проявлений заболевания. При L-формах обменные процессы более снижены и антигенные свойства отсутствуют или незначительно выражены. Специфические антитела не вырабатываются или они в небольшом количестве, серологические реакции слабо положительные или отрицательные. Чем больший период времени от момента заражения, тем большее количество бледных трепонем трансформируется в формы выживания (цисты, споры, L-формы, зерна), при которых противосифилитическая терапия не эффективна.

Псевдорезистентность - после проведенного лечения несмотря на положительные серологические реакции бледная трепонема в организме отсутствует. Антигена в организме нет, но продолжается выработка антител, которые фиксируются при постановке серологических реакций.
Серологическая резистентность может развиваться вследствие:

  • неполноценного лечения без учета давности и стадии заболевания;
  • недостаточной дозы и в частности из-за неучета массы тела пациентов;
  • нарушения интервала между введением препаратов;
  • сохранения в организме бледных трепонем несмотря на проведенное полноценное специфическое лечение, из-за их стойкости к пенициллину и другим химиопрепаратам в случае наличия скрытых, осумкованных очагов поражения во внутренних органах, нервной системе, лимфатических узлах, которые малодоступны для антибактериальных препаратов (нередко бледные трепонемы обнаруживаются в тканях рубца через много лет после окончания терапии, в лимфатических узлах иногда удается обнаружить бледные трепонемы через 3-5 лет после противосифилитической терапии);
  • снижения защитных сил при различных заболеваниях и интоксикациях (эндокринопатии, алкоголизм, наркомания и др.);
  • общего истощения (приемом пищи бедной витаминами, белками, жирами).
Кроме этого, нередко выявляется ложная позитивация серологических реакций, не связанная с наличие у больных сифилиса и вызванная:
  • сопутствующими неспецифическими заболеваниями внутренних органов, нарушениями сердечнососудистой системы, ревматизмом, дисфункциями эндокринной и нервной систем, тяжелыми хроническими дерматозами, злокачественными новообразованиями;
  • поражениями нервной системы (тяжелые травмы, сотрясение головного мозга, психические травмы);
  • беременностью; хроническими интоксикациями алкоголем, никотином наркотиками; инфекционными болезнями (малярия, туберкулез, вирусный гепатит, дизентерия, сыпной, брюшной и возвратный тифы).
Указанные факторы могут оказывать влияние на иммунологическую реактивность организма как в период активного развития сифилитических проявлений, так и во время их регресса.

Серологические исследования крови имеют исключительно важное значение. В настоящее время применяется комплекс, серологических реакций - обычно ставят классическую реакцию Вассермана и две осадочные реакции. Из осадочных реакций чаще применяют реакции Кана, Закс-Витебского и цитохолевую.

Результаты серологических исследований обозначаются плюсами следующим образом: + + + + резко положительная, + + + положительная, + + и + слабо положительная; отрицательную реакцию обозначают минусом (-).

Кроме указанного комплекса серологических реакций, в последние годы получила широкое признание реакция иммобилизации бледных трепонем (тест Нельсона - Майера), которая проводится со специфическим антигеном (взвесь бледных трепонем). Эта реакция более специфична, чем упомянутый комплекс реакций, которые проводятся с неспецифическими антигенами. Особую ценность тест Нельсона - Майера имеет при решении вопроса о специфичности положительной реакции Вассермана и осадочных реакций у лиц, не имеющих симптомов сифилиса.

Серологические реакции в различные периоды сифилиса . Диагностическая ценность серологических реакций в различные периоды сифилиса не одинакова. В первичном периоде - в течение 2-3 недель после возникновения первичной сифиломы - серологические реакции, как правило, отрицательны; начиная с 3-4-й недели они у некоторых больных становятся положительными. По мере приближения болезни к вторичному периоду процент положительных серологических реакций нарастает, а ко времени появления вторичных симптомов сифилиса они становятся положительными почти у 100% больных.

В свежем вторичном и рецидивном периодах болезни серологические реакции в крови остаются положительными почти у 100% больных.

В третичном периоде сифилиса с активными проявлениями болезни серологические реакции нередко, примерно у 15% больных, могут быть отрицательными, а при отсутствии активных явлений болезни число отрицательных реакций может достигать 30-40%.

Серологические реакции как критерий успешного лечения сифилиса . Специфическое лечение сифилиса необходимо проводить под контролем серологических реакций. Обычно у больных первичным серопозитивными и вторичным свежим периодом серологические реакции через 1-2 месяца рационального лечения сифилиса становятся отрицательными; во вторичном рецидивном периоде они могут стать отрицательными в этот же срок или несколько позже. Если же в указанные сроки серологические реакции не становятся отрицательными, то это свидетельствует о недостаточной эффективности лечения. В таких случаях необходимо усилить эффективность терапии, но не путем увеличения дозировки препаратов, а изменив методику лечения и присоединив методы неспецифической терапии.

Резко положительные серологические реакции при отсутствии клинических симптомов можно рассматривать как симптом сифилиса при условии, что они остаются резко положительными при повторном исследовании и что исследование производилось в квалифицированной серологической лаборатории.

Слабо положительные серологические реакции при отсутствии клинических симптомов и других данных не могут служить опорой для диагноза сифилиса; такие результаты следует принимать во внимание лишь в тех случаях, когда в прошлом у больного был сифилис и он подвергался соответствующему лечению. Слабо положительные серологические реакции могут иметь также значение при наличии у больного какого-либо заболевания неизвестной этиологии. В этих случаях результаты серологических реакций надо оценивать с учетом других анамнестических, клинических и лабораторных данных.

Неспецифические серологические реакции могут наблюдаться при многих заболеваниях. Так, резко положительный результат нередко бывает при проказе и возвратном тифе . При малярии , туберкулезе , бруцеллезе и многих других инфекционных заболеваниях, а также у больных злокачественными опухолями результаты обычно слабо положительны или положительны (+ + +) и редко бывают резко положительными (+ + + +).

Употребление перед исследованием алкогольных напитков или жирной пищи может обусловить неспецифическую слабо положительную реакцию. Кровь для серологических исследований следует брать натощак.

При отсутствии серологической лаборатории кровь для исследования рекомендуется пересылать почтой в конверте в виде «сухой капли».

Для получения сухой капли набирают в пробирку 5 мл крови из локтевой вены. Пробирку с кровью оставляют на 2 часа при комнатной температуре. Образовавшийся кровяной сгусток отделяют от стенок пробирки прокаленной и остуженной проволокой, затем кровь помещают в прохладное место до следующего утра. На следующий день градуированной пипеткой набирают 0,75 мл сыворотки, которую наносят на вощеную бумагу или полоску целлофана. Сыворотку на бумаге или целлофане оставляют до следующего дня при комнатной температуре, защитив ее от пыли и мух. После этого вощеную бумагу или целлофан с высушенной сывороткой свертывают в виде аптечного порошка, вкладывают в конверт и вместе с сопроводительной запиской отсылают почтой в ближайшую серологическую лабораторию.

Следует отметить, что метод серологических реакций с помощью «сухой капли» крови является менее надежным, чем обычный.

Чем раньше и точнее выявлен сифилис — тем проще лечение и выше вероятность, что для пациента оно пройдет гладко.

Цель для всех лабораторных исследований одна: поставить диагноз однозначно и быстро. Но ни один из современных высокотехнологичных анализов на сифилис не дает результат однозначно и с точностью 100%. Старые методы совершенствуются, новые изобретаются, но до сих пор в клинической практике врачам всегда приходится использовать комбинацию из нескольких разных анализов на сифилис. Полагаться на результат какого-то одного медики не могут.

Анализов на сифилис существует столько разновидностей, что с ходу разобраться во всех аббревиатурах невозможно:

Впервые выявить болезнь с помощью лабораторной реакции удалось в 1906 году. Это заслуга немецкого ученого Августа Вассермана, в честь которого реакция и названа. С тех пор прошло много времени, метод устарел и на практике не используется, но до сих пор диагностика сифилиса прочно ассоциируется именно с анализом РВ.

Пройти исследование на сифилис может потребоваться человеку по самым разным причинам.
Самая первая причина, что приходит в голову — при подозрении наличия инфекции, и на практике она не самая распространенная. В этом случае важно понимать, что у инфекции есть инкубационный период (от момента заражения до формирования твердого шанкра) и первичный серонегативный период (твердый шанкр в первые три недели) — в это время анализы будут отрицательными. Поэтому если опасения серьезные — анализы повторяют через несколько недель.

Чаще провериться на сифилис требуется людям, никакой инфекции не подозревающим. Обычно это происходит при приеме на работу (анализ входит в медицинскую книжку) и при периодических диспансеризациях (мед. осмотрах). Еще в обязательном порядке кровь на сифилис сдают:

  • доноры,
  • женщины в первые недели беременности — дважды, при поставке на учет в женскую консультацию и в роддоме за несколько недель до родов,
  • пациенты перед операцией или любыми другими медицинскими инвазивными вмешательствами (ФГДС , бронхоскопия и т.д.).

В конце статьи мы ответили на самые частые вопросы людей, столкнувшихся с диагностикой сифилиса. Нет времени читать подробности про методы исследований — .

Все виды исследований на сифилис

Существует 2 основные группы методов исследования на сифилис: прямые и непрямые.

  • Прямой метод — это исследование, при котором в биоматериале ищут саму инфекцию — отдельных представителей возбудителя целиком, или их куски — ДНК .
  • Непрямые методы (серологические реакции) — это исследование, при котором в крови пытаются выявить антитела к возбудителю сифилиса. Логика такова: если найден иммунный ответ, характерный для какой-то инфекции — значит, есть и сама инфекция, этот иммунный ответ вызвавшая.

Прямые методы, — самые достоверные: если бактерия «поймана с поличным», то наличие болезни считается доказанным. Но бледную трепонему поймать сложно, и отрицательные результаты тестов наличие инфекции не исключают. Эти исследования имеет смысл проводить только при наличии высыпаний и только при ранней форме сифилиса — до двух лет болезни. Т.е. определить скрытый сифилис или поздние его формы этими методами нельзя, поэтому в клинической практике они используются редко и только для подтверждения других анализов.

К прямым методам относятся: Темнопольная микроскопия, Заражение лабораторных животных, ПЦР .

  1. Темнопольная микроскопия (ТПМ) — исследование бледных трепонем под микроскопом. Материал берется из твердого шанкра или высыпаний. Метод дешевый и быстрый, и выявляет сифилис уже в самом начале первичного периода, когда анализы крови на сифилис еще отрицательны. Но бактерии, в высыпаниях находящиеся в небольшом количестве, могут легко не попасть в соскоб. Плюс бледные трепонемы можно легко перепутать с другими обитателями ротовой полости, анального канала и пр.
  2. Заражение лабораторных животных — это очень дорогой и кропотливый метод, применяется только в исследовательской практике.
  3. ПЦР — относительно новый метод, в нем ищут ДНК инфекции. Для исследования годится любая ткань или жидкость, в которой могут содержаться бледные трепонемы: кровь, моча, секрет простаты, эякулят, соскоб с высыпаний на коже, из мочеполового тракта, ротоглотки или конъюнктивы. Анализ очень чувствительный и специфичный. Но сложный и дорогой. Назначают его в случае сомнительных результатов других анализов.

Непрямые методы, они же серологические реакции, — основа лабораторного исследования сифилиса. Именно эти методы используют для массового скрининга населения, для утверждения диагноза и контроля лечения. Непрямые методы исследования разделяются на нетрепонемные и трепонемные тесты.

Нетрепонемные тесты заметно дешевле. Для их проведения используют не сам белок-антиген, специфичный для сифилитической трепонемы, а его замену — кардиолипиновый антиген. Эти тесты являются высочувствительными, но слабоспецифичными. Это означает, что такие тесты укажут всех, у кого имеется и сифилис и даже больше: у здоровых людей также могут быть ложноположительные результаты. Используются для массового скриннинга населения, но в случае положительного результата обязательно требуют подтверждения более специфичными тестами — трепонемными. Еще нетрепонемные тесты очень полезны в оценке эффективности лечения: при эффективном лечении объем антител в крови снижается, и соответственно снижается их титр (об этих титрах чуть дальше расскажем подробнее). Наиболее достоверным результат этих нетрепонемных тестов будет во время раннего сифилиса, особенно во вторичный период.

К нетрепонемным тестам относятся:

  • Реакция Вассермана ( , она же РВ , или РСК) — уже устарела и не используется, но из-за прочной ассоциации с болезнью так часто называют любые тесты для скрининга населения на сифилис. Если видите в направлении от врача запись «анализ РВ » — не смущайтесь, в лаборатории наверняка все поймут правильно и будут делать RPR .
  • Реакция микропреципитации (МР , она же РМП) — это простой и дешевый тест на определение сифилиса. Ранее использовался в качестве основного нетрепонемного теста, но сейчас уступил место более удобному и объективному RPR -тесту.
  • Быстрый плазмареагиновый тест (RPR -тест) — быстрый простой и удобный тест для массового обследования населения и контроля лечения. Является основным нетрепонемным тестом, применяющимся в России и за рубежом.
  • TRUST — это более современная модификация RPR -теста. По-другому его обозначают, как RPR -тест с толудиновым красным. В России используется лишь в небольшом количестве лабораторий.
  • VDRL — этот анализ по достоверности результатов аналогичен РМП , и также уступает RPR . В России он не нашел широкого применения.
  • USR -тест (или его модификация — RST -тест) — более усовершенствованный VDRL тест, однако в России также применяется крайне редко.

Трепонемные тесты проводятся с трепонемными антигенами. Они более специфичны, и потому тщательнее отсеивают здоровых от больных. Но чувствительность их ниже, и такие анализы могут пропустить больного человека, особенно на ранней стадии болезни. Еще одна особенность — трепонемные тесты проявляются позже нетрепонемных, только спустя три-четыре недели после появления твердого шанкра. Поэтому их нельзя использовать в качестве скрининговых. Главное предназначение трепонемных анализов — подтвердить или опровергнуть результаты нетрепонемных тестов.

Еще результаты трепонемных анализов будут оставаться положительными в течение нескольких лет после успешного лечения. Из-за этого их не используют для контроля эффективности лечения, и также не опираются на результаты этих анализов, если они не подтверждены нетрепонемными тестами.

К трепонемным тестам относят:

  • РПГА (или ее более современная модификация —ТРРА,ТРНА) — реакция пассивной гемагглютинации. Основная трепонемная реакция, применяемая сейчас за рубежом и в России. Простой и удобный тест для определения антител сифилиса в организме.
  • ИФА (анти-Tr. pallidum IgG/IgM) — иммуноферментный анализ, он же ELISA с английской аббревиатуры. Этот тест возможно проводить и с кардиолипиновым антигеном, так и с трепонемным. Он может использоваться как скрининговый, так и как подтверждающий. По достоверности он не уступает РПГА и так же является рекомендуемым трепонемным тестом для подтверждения диагноза сифилиса.
  • Иммуноблоттинг — это более дорогой усовершенствованный ИФА -тест. Используется только в сомнительных случаях.
  • РИФ — реакция иммунофлуоресценции. Технически трудный и недешевый анализ. Является второстепенным, применяется для утверждения диагноза в сомнительных случаях.
  • РИБТ (РИТ) — реакция обездвиживания (иммобилизации) бледных трепонем. Это реакция сложна, длительна в исполнении и трудна в интерпретации результата. Кое-где еще используется, но постепенно отходит на второй план, уступая место РПГА и ИФА .

Расшифровка серологических анализов на сифилис:

Алгоритм постановки диагноза «сифилис»

Любой диагноз состоит из трех основных столпов медицины: анамнеза (истории болезни), клинических проявлений (симптомов) и лабораторного обследования. Если врач по рассказу пациента и по внешнему осмотру его тела подозревает сифилис, он назначает комплекс анализов (или комплекс серологических реакций — КСР). В него обязательно входят 1 нетрепонемный тест (РМП или RPR) и 1 трепонемный тест (РПГА или ИФА). Если результаты этих тестов расходятся — выполняют дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА или РПГА). Это самая простая схема. В случае сомнительных показателей, в зависимости от ситуации, врач назначает другие методы диагностики.

Экспресс-тест на сифилис, или как определить сифилис в домашних условиях

Тест на сифилис, который можно провести самостоятельно, существует. Его можно свободно купить в аптеке, средняя стоимость — 200-300 руб. Принцип определения болезни аналогичен нетрепонемному RPR . Производители заявляют высокую точность, но в реальности она невысока, не более 70%.

Алгоритм действий при проверке напоминает тест на беременность, только вместо мочи используется кровь. Капля крови наносится на индикатор, и в течение 10-15 минут появляется результат. 1 полоска — тест отрицательный, 2 полоски — тест положительный.
Мы не рекомендуем этот способ диагностики. Если есть сомнения по поводу сифилиса, лучше сразу обратиться к врачу, или хотя бы в независимую лабораторию. Выйдет чуть дороже и дольше, зато намного точнее.

Расшифровка результатов на сифилис: плюсы, кресты и титры.

От результатов тех или иных анализов зависит дальнейшая тактика врача. Результаты скрининговых анализов выражаются либо в крестах (плюсах), либо в отдельной записи:

4 или 3 креста — положительный результат, необходимо дальнейшее обследование на сифилис с помощью других методов диагностики.
2 или 1 крест — сомнительный результат, рекомендуется повторить результат через 10 дней.
0 крестов — отрицательный результат, сифилис не обнаружен.

В случае положительной и сомнительной реакции проводится дополнительное исследование взятой крови: разведение ее с 1:2 до 1:1024 и добавление в каждый титр крови по капле кардиолипинового антигена. В результат записывается максимальный титр, при котором произошла реакция: чем больше разведение, тем больше значение титра, тем выше количество бледных трепонем в крови. Но главная задача определения титра состоит не в том, чтобы вычислить степень зараженности крови, а в том, чтобы проконтролировать успешность лечения: лечение считается эффективным если за 4 месяца титр упадет в 4 раза. К концу лечения результаты нетрепонемных тестов должны стать отрицательными.

Наибольшая чувствительность скрининговых тестов наблюдается во вторичном периоде сифилиса (100%), чуть меньше в первичном (86%) и еще меньшей — в третичном (73%).

Важные нюансы в диагностике сифилиса:

  1. При проведении тестов возможны ложноположительные результаты. Особенно часто они встречаются при скринингах. Если вы никогда не болели сифилисом, а анализы положительные — сразу паниковать не стоит, необходимо сделать еще минимум один альтернативный анализ.
  2. Встречаются и ложноотрицательные результаты. Если имеется подозрение на сифилис, то лучше повторить анализ через несколько недель.
  3. Вылеченный сифилис остается положительным по результатам трепонемных тестов в течение нескольких лет или жизни.

Самые частые вопросы про анализы на сифилис

Как сдать анализ на сифилис бесплатно?

Для этого необходимо обратиться в поликлинику по месту жительства и посетить своего участкового врача, который даст направление на анализ. Исследование на сифилис является бесплатным для всех жителей РФ по полису ОМС .

Где можно сдать анализы на сифилис анонимно?

Анонимно анализы можно сдать в любой платной лаборатории, кожвендиспансеры часто сами предлагают эту услугу. Также, провести тест на сифилис возможно и в домашних условиях с помощью экспресс-тестов, которые продаются в аптеке. Однако необходимо помнить, что такой тест не дает точного результата, и при подозрении на сифилис нужно обратиться к врачу.

Через сколько дней после половой связи можно сдать кровь на сифилис?

Через 1-1,5 месяца. Если произошло заражение, то анализ на сифилис будет положительным не ранее чем через семь-десять дней после появления твердого шанкра, или через 4-5 недель после заражения. Этот период может быть и дольше, так что при отрицательных результатах анализ стоит повторить спустя 2 недели.

Откуда берут кровь на сифилис?

Кровь на сифилис берут чаще из вены, однако могут брать и из пальца. Это зависит от вида анализа.

Подготовка. Как сдавать анализ на сифилис?

Перед сдачей крови на сифилис нельзя есть в течение четырех часов — кровь должна сдаваться на голодный желудок. Кроме того, за 12 часов до анализа нельзя употреблять алкоголь. Это важно, так как повреждение печени алкоголем может спровоцировать ложноположительные анализы.

Сколько в среднем делается анализ на сифилис?

Результаты, как правило, становятся известны на следующий день. Проведение экспресс-тестов занимает по времени не более 30 минут.

Какой анализ берут на сифилис и как он называется?

Для скрининга, когда подозрения на болезнь нет, — либо РМП (реакция микропреципитации), либо RPR (быстрый плазмареагиновый тест). Иногда такие скрининговые тесты называют реакцией Вассермана.

Если есть какие-то реальные подозрения или сомнения — никогда не ограничиваются одним анализом. Одновременно выполняют один любой из скрининговой группы (РМП или RPR) и один любой из более специфичной проверочной группы (РПГА или ИФА), дальше действуют в зависимости от результатов и истории пациента.

Может ли анализ на сифилис быть ошибочным?

Может! Вероятность ошибки разных методов зависит прежде всего от периода болезни и общего состояния организма.

Нетрепонемные тесты чувствительнее всего в разгар болезни — во вторичном периоде. Из-за невысокой специфичности они часто дают ложноположительные результаты. Это может случиться из-за повышения температуры, гриппа или другой инфекционной болезни, недавно проведенной вакцинации, хронических болезней и ряда других причин.

Трепонемные тесты более чувствительны в поздний период. Они могут также давать ложноположительные результаты, но только при наличии в организме похожих на бледную трепонему патогенных бактерий, вызывающих другие заболевания: невенерические трепонематозы пинта (в России редко) или болезнь Лайма (передается через укус клещей).

Ложноотрицательные результаты тестов возможны у всех методов диагностики. Они зависят от иммунного ответа организма: нет ответа — нет реакции на сифилис. Такое возможно у ВИЧ-инфицированных людей, а также иммуно-ослабленных по другим причинам. Кроме того, существует и обратная реакция: гиперпродукция антител, эффект «прозоны», в котором антител так много, что они не дают друг другу осуществить реакцию с антигеном. В результате образуется ложноотрицательный результат.

Могут ли общие анализы показать сифилис?

Сифилис невозможно определить ни по общему анализу крови, ни по биохимическому. Не покажет его и общий анализ мочи или обычный мазок из влагалища. Все исследования на сифилис узкоспециализированы и каждый имеет свое название. По любым другим анализам невозможно вычислить, есть у человека сифилис или нет. Но что покажут другие анализы, если человек болен сифилисом? Разберем каждый из них:

Общий анализ крови: показывает основные клетки крови — эритроциты, лейкоциты, тромбоциты. В конце первичного и в начале вторичного периода у человека могут подниматься лейкоциты, а также увеличиваться СОЭ — показатель воспаления. Это очень неспецифичные показатели, указывающие просто на то, что в организме идет борьба с бактериальной инфекцией. В остальном анализ крови будет соответствовать общему состоянию организма.

Биохимический анализ крови: показывает работу печени, почек, сердца, поджелудочной железы и других органов. Если сифилис еще не поразил эти органы, и они работают исправно — анализ крови будет в норме.

Общий анализ мочи: показывает работу почек и эндокринной системы, а также общее состояние организма. Если острых или хронических заболеваний этих систем нет — анализ будет в норме.

Мазок из влагалища: определяет, есть ли воспалительный или онкологический процесс, а также дисбактериоз. Поставить сифилис по такому мазку нельзя.

Сифилис – это опасное венерическое заболевание, которое вызвано бледной трепонемой, передается половым путем и способно поражать все органы и системы организма. В настоящее время при своевременной диагностике и проведенной терапии стало возможным полное излечение сифилиса.

Диагностирование этого недуга основывается на лабораторных и клинических данных.

Виды серологических реакций на сифилис

Среди лабораторных исследований особенно ценится серологический анализ, который требуется не только для диагностирования недуга, но и для изучения общей картины влияния лечебных мер на болезнь, изучение эффективности терапии.

Серологическая реакция на сифилис стала отдельной отраслью медицины. Стоит заметить, что созданы различные типы такой диагностики, которые во многих странах официально признаны. При этом необходимо, чтобы врач имел достаточную квалификацию в области серологии, которая потребуется для правильного истолкования результатов.

На пространстве нашей страны для серологического исследования сифилиса применяют следующую инструкцию (утверждена в 1995 году):

1. КСР (комплекс серологических реакций). В этот список входит реакция связывания трепонемные, кардиолипиновые антигены с комплементами. Также микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном;

2. Трепонемные реакции. В их составе используются реакции бледных трепонем, и реакция иммунофлюоресценции.

Этот небольшой список мер, которые обязательны для серологического анализа сифилиса имеют различную «чувствительность», специфичность, и рекомендуются строго по отношению к каждому, отдельно взятому случаю и поставленной задачи. Теперь давайте подробнее.

Микрореакция преципитации. Особенности и результаты

Применяется при массовом обследовании населения на сифилис. Существуют разновидности – микрореакция на стеле, экспресс – метод диагностики сифилиса, для чего используется как сыворотка крови обследуемых, так и плазма. Эта реакция возникает при контакте со специфическим кардиолипиновым антигеном.

Как правило, результат проведенного анализа оценивается качественно - 4+, 3+,2+, отрицательный. В свою очередь, экспресс-метод позволяет получить результат уже через полчаса, и для исследования потребуется всего лишь несколько каплей плазмы крови, что берут с пальца пациентов.

Таким же способом обследуются те лица, которые поставлены на учет в венерологическом отделении. Если применять такую методику анализа локально, изолировано, то она представляет собой лишь отборочный тест.

На основании экспресс - теста нельзя точно сказать, что пациент больной сифилисом, но при положительном результате – врач может написать направление к дерматовенерологу. Этот специалист проведет дальнейшее обследование с помощью других методик – РИФ, УСР, РИБТ. Стоит также заметить, что экспресс-анализ не проверяют у беременных женщин, доноров, так как в большинстве случаев получается ошибочный, положительный результат. Зачастую экспресс – тест могут проводить медработники, прошедшие специальную подготовку, но изучение анализа и определение результатов обязаны лаборанты.

Реакция связывания комплимента или РСК

Реакция с кардиолипиновыми и трепонемными антигенами требуется для подтверждения первоначального диагноза (если экспресс-тест и МП показали положительный результат). Правда, такую процедуру рекомендуют применять, если имеются активные проявления, или же обследуемые лица были в половом контакте с зараженным сифилисом. Кроме того, подлежат диагностированию на РСК люди, у которых подозревается скрытый (латентный) сифилис. Естественно, реакцию на связывание комплимента назначают и для того, чтобы определить эффективность терапии.

Для обследования необходимо 5-7 миллилитров крови из локтевой вены. У грудничков кровь на анализ выбирают из височной вены, или из надреза на пятке.

Забор крови у пациента необходимо делать на «голодный желудок». Далее врач оставляет образец в сухой, чистой пробирке на 2-3 часа при комнатной температуре (это необходимо для свертывания). Постановку комплекса серологических реакций производят в специально подготовленных лабораториях.

Принцип действия описываемой реакции объясняется тем, что реагины, обнаруженные в сыворотке крови предположительно больных сифилисом, умеют вступать в реакцию с различными антигенами. Образовавшиеся комплексы классифицируют введенное в реакцию вещество. Для индексирования КСР используется гемолитическая система (т.е. применяется смешение эритроцитов барана с гемолитической сывороткой).

Если случился КСР, то эритроциты выпадают в осадок, и такой процесс заметно невооруженным глазом. Выраженность реакции определяется врачом по такой классификации:

  • 4+ Резко положительный.
  • 3+ Положительный.
  • 2+, 1+. Слабоположительный.
  • Отрицательный.

Следует заметить, что кроме качественной оценки применяют количественную. Такая система оценивания требуется для того, чтобы определить стадию развития сифилиса, и эффективность проводимой терапии.

Впервые такой принцип исследования использовали в 1906 году Нейссер, Брук и Вассерман. В «роли» антигена они применили водный экстракт печени. В последующем времени, такую реакцию стали подставлять и под другие антигены, что сделало её еще более чувствительной. В настоящее время для постановки реакции советуют применять такие антигены:

  • Кордилипиловый антиген (экстракт из сердца быка с избыточным количеством лецитина и холестерина).
  • Трепонемный антиген (взвесь из апатогеннных культуральных трепонем, которая была обработана ультразвуковым излучением).

Реакция связывания этих антигенов достигает положительного результата через две – четыре недели с момента применения, и постепенно увеличивается, достигая максимума в титре, что наблюдается при появлении вторичного свежего сифилиса. Затем, титр специфических веществ постепенно снижается, и при рецидивной форме сифилиса, как правило, не превышает отметки в 1:180 – 1:120. Среди страдающих третичным проявлением сифилиса описанная реакция положительна в 70 процентах случаев.

Важно подметить, что комплекс серологических реакций не является исключительным показателем сифилиса в организме человека, и может дать неспецифические (ложноположительные) результаты. Правда, такое возникает, если специалист допустил ошибку в обследовании – некачественная процедура забора крови, грязные пробирки, низкая квалификация и пр.

Кроме того, ложноположительный результат чаще всего получают пациенты, страдающие лепрой, малярией, ситуационными недугами. Также получить ошибочный диагноз могут люди с туберкулезом, заболеваниями печени, а также те, которые принимают медикаменты. У женщин ложноположительный диагноз можно поставить, если пациентка беременна, или у неё критические дни.

  • У младенцев на десятом дне жизни;
  • При лихорадочных явлениях в течение двух недель после родов;
  • Если у пациента есть свежие травмы, было хирургическое вмешательство, вакцинация.

А все потому, что физико-химические реакции в сыворотке крови при таких явлениях могут также показать ложноположительный результат на сифилис.

Реакция РИФ

Для того чтобы отличить ложноположительный от истинного результатов обследования КСР, в нашей стране применяет специфические серологические реакции, такие как РИФ и РИБТ. Также такой метод исследования рекомендован для диагностики формы заболевания, и при подозрении на сифилитическую инфекцию.

Для проведения данной процедуры потребуется количество крови в объеме 5-10 мл, которую также можно брать из локтевой вены на «голодный желудок». Полученную кровь вливают в сухую пробирку, оставляют на некоторое время в комнате для свертывания, а позже – отправляют в обследование в специальную лабораторию, которая имеется в кожно-венерологических отделениях.

Основа реакции РИФ – это непрямо метод определения флюоресцирующих антител. Антигеном для связывания в данном случае служит взвесь обработанных ультразвуковым излучением бледных трепонем. Таким образом, вещество фиксируют на предметных стеклах, куда также выставляют вещество крови пациента вместе с антивидовой флюоресцирующей сывороткой. Для определения результата потребуется люминесцентный микроскоп, с помощью которого специалист оценит степень свечения трепонем. Считается, что при положительном результате трепонемы имеют желто-зеленый оттенок свечения, и «мощность» этого процесса оценивается плюсами (от одного до четырех). Отрицательный результат – трепонемы не светятся.

Реакция РИБТ

Другая реакция, которая помогает диагностировать сифилис – это РИБТ, которая была впервые применена в 1949 году Нельсоном и Мейером. Её основа – феномен обездвиженных, бледных трепонем антигеном из сыворотки крови больного, в которой присутствует комплемент.

В качестве антигена для реакции применяется живые, бледные трепонемы, которые получены из крови зараженных сифилисом кроликов. Подсчет утративших подвижность трепонем проводиться под микроскопом. Результат реакции оценивается в процентах, где:

  • Отрицательный – 0-20%
  • Сомнительный – 21-31%
  • Слабоположительный – 31-50%
  • Положительный – 51-100%.

Реакция может показать положительный результат в конце первичной стадии сифилиса, и в большинстве случаев итог не меняется на протяжении всех этапов болезни. Иногда РИБТ положительна даже при полном выздоровлении. При третичном сифилисе, поражениях внутренних органов, врожденном сифилисе, когда КСР неточно показывает результаты, эта реакция дает истинные результаты в 98-100% случаев. К слову, чтобы диагностировать латентную, скрытую форму сифилиса обязательно требуется диагностика на РИБТ.

РИБТ может показать ложноположительный результат, если в исследованной крови есть элементы трепонемоционных веществ – антибиотиков, которые приводят к неспецифическому обездвиживанию живых бледных трепонем. Поэтому, брать кровь у пациента, которому предписали приём антибиотиков советуют не раньше, чем через две недели после окончания антибактериальной терапии.

Анализ спинномозговой жидкости

Часто, серологическое обследование применяют и для того, чтобы точно узнать степень поражения нервной системы сифилисом. Для этого применяют анализ на основе спинномозговой жидкости пациента. Также это исследование поможет определить белок, ферментные элементы, что свидетельствует о развитии патологии, и «облегчит» врачу уточнение диагноза. Как вы уже догадались, забор спинномозговой жидкости проводят не из пальца, а при помощи люмбальной пункции. Эта процедура требует от врача осторожности, следования всем нормативам и технике безопасности, чтобы не усугубить положение больного. Как правило, такое обследование назначается в случае подозрения любой формы сифилиса центральной нервной системы.

При серологическом обследовании на сифилис применяются реакция Вассермана с тремя антигенами и реакция Колмера . Степень позитивности этих реакций обозначается числом плюсов: + + + + (резко положительная), + + + (положительная), ++ или + (слабоположительная), ± (сомнительная), - (отрицательная). При резко положительных результатах реакций Вассермана и Колмера проводят количественное определение реагинов (по методике Боаса), что позволяет судить об эффективности проводимой терапии и помогает дифференцировать ранний и поздний скрытый сифилис. Снижение титра реагинов свидетельствует о терапевтической эффективности проводимого лечения, а высокий титр реагинов обычно выявляется у больных при раннем скрытом сифилисе.

В связи с большим объемом профилактических обследований и сложностью выполнения КСР в настоящее время широко применяется экспресс-метод серодиагностики сифилиса , который используется в качестве отборочного теста. Реакция ставится с кровью больного.

Для этой цели используется также реакция VDRL (Venereal Diseases Reseach Laboratory). При этом берут сыворотку крови больного и липоидный антиген. С помощью VDRL можно получить количественную оценку циркулирующих антител (1:2:4:8:16).

В ряде случаев серологические реакции могут давать ложноположительный результат . Ложноположительные серореакции наблюдаются при малярии, сыпном, возвратном тифе, лепре, бруцеллезе, пневмонии, скарлатине, при злокачественных опухолях, во время менструаций, за 2 нед до родов и в течение 3 нед после родов, после приема алкоголя, жирной пищи, некоторых медикаментов, при хронических пиогенных процессах, болезнях печени и др. С возрастом пациентов количество неспецифических ложноположительных результатов по стандартным серореакциям увеличивается.

Более специфическими реакциями для диагностики сифилиса являются реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) и реакция иммунофлюоресценции (РИФ). С их помощью можно отличить ложноположительные от истинно положительных стандартных серологических реакций, они позволяют выявить больных с поздними формами сифилитической инфекции, протекающей с отрицательными классическими реакциями. Неоценима роль РИБТ при распознавании ложноположительных результатов серологических реакций у беременных, когда необходимо решать вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ). Материалом для исследования является сыворотка больного. Сущность реакции заключается в том, что в присутствии иммобилизинов, испытуемой сыворотки и активного комплемента происходит потеря подвижности бледных трепонем. Иммобилизины, относящиеся к иммуноглобулинам класса G, появляются в сыворотке крови больных позднее, чем другие антитела. Поэтому она становится положительной позже, чем стандартные серореакции и РИФ. Оценка реакции производится при иммобилизации до 20 % бледных трепонем - реакция считается отрицательной; при иммобилизации от 21 до 50 % бледных трепонем - слабоположительной; при иммобилизации от 50 до 100 % - положительной. РИБТ положительная у больных с тропическими трепонематозами. Иногда реакция дает ложноположительные результаты при саркоидозе, эритематозе, туберкулезе, циррозе печени, атеросклерозе и др. Процент ложноположительных результатов несколько повышен у пожилых людей. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Принцип основан на выявлении флюоресцирующих антител, меченных флюорохромом и соединяющихся с соответствующими антигенами. Образовавшийся комплекс хорошо светится в сине-фиолетовых лучах люминесцентного микроскопа. Реакция отличается высокой чувствительностью, сохраняя при этом высокую специфичность. Она становится положительной на 3-4-й неделе после заражения сифилисом. Выявляемые с помощью этой реакции антитела относятся к группе иммуноглобулинов А.

Реакцию ставят в нескольких модификациях: РИФ-10, РИФ-200, РИФ-abc . Первая реакция считается более чувствительной, две последние - более специфическими. Поэтому РИФ-10 назначается для ранней диагностики сифилитической инфекции, РИФ-200 - в распознавании неспецифических результатов КСР, а также для диагностики других форм заболевания, в том числе и скрытого сифилиса. Главными достоинствами реакции иммунофлюоресценции с абсорбцией с бледной трепонемой являются ее довольно высокие , а также быстро наступающая реактоспособность.

Антигеном для данной реакции служит взвесь бледных трепонем из пораженных сифилисом яичек кролика, фиксированная ацетоном на предметном стекле. Могут быть использованы лиофилизированные бледные трепонемы, суспендированные в изотоническом растворе натрия хлорида. Инактивированную сыворотку инкубируют с сорбентом (трепонемы Рейтера) для абсорбирования неспецифических групповых антител. Дальнейший ход реакции ведется по методике РИФ.

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ). Она основана на способности вирулентных тканевых трепонем, сенсибилизированных сывороткой больного сифилисом, в присутствии комплемента и эритроцитов прилипать к поверхности последних. При центрифугировании смеси с эритроцитами прилипшие бледные трепонемы выпадают в осадок и исчезают из надосадочной жидкости. РИП применяют при диагностике форм сифилиса, когда на основании данных анемнеза, клиники, результатов КСР не удается подтвердить диагноз заболевания, при дифференцировании неспецифических результатов КСР, при контрольном наблюдении после окончания лечения. По специфичности и чувствительности РИПБТ близка к РИБТ и РИФ.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Принцип метода состоит в том, что формализированные тонизированные бараньи эритроциты соединяются с экстрактом из патогенных бледных трепонем и образовавшийся комплекс фиксируется на эритроцитах. Он представляет собой корпускулярный антиген. При взаимодействии его с гомологичными антителами создается иммунный комплекс, который вызывает агглютинацию эритроцитов.

===================================